先天性腎盂輸尿管連接處梗阻性腎積水的神經(jīng)性因素探討.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文先天性腎盂輸尿管連接處梗阻性腎積水的神經(jīng)性因素探討姓名：洪淳申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：楊琳琳20090511廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文先天性腎盂輸尿管連接處梗阻性腎積水的神經(jīng)性因素探討2標本的獲取、制片標本獲取后于10％甲醛溶液中固定24h，二甲苯透明，梯度酒精脫水，石蠟包埋，做3Ilm厚連續(xù)切片。3HE染色各組樣本在石蠟包埋切片后行常規(guī)HE染色，光鏡下觀察各組標本是否存在有神經(jīng)節(jié)細胞。4免疫組化檢測標本

2、中PGP95的表達按照EnVisionSystem二步法分步驟進行免疫組化。棕褐色示PGP95免疫活性陽性部位。計數(shù)按照Weidner等的方法并加以改進：先在低倍視野內(nèi)(100)找到組織切片內(nèi)神經(jīng)纖維密度最高的區(qū)域，即“熱點“，選取三個“熱點“；然后在高倍視野內(nèi)(200)計數(shù)神經(jīng)纖維的數(shù)目。分辨不清的不計入計數(shù)結(jié)果。計數(shù)由兩名病理科主治以上醫(yī)師采用雙盲法分別對同一組織切片進行計數(shù)，取兩者計數(shù)中較高數(shù)據(jù)作為該片的計數(shù)結(jié)果。結(jié)果用均數(shù)標準誤

3、表示。5電子顯微鏡下觀察結(jié)果各隨機從A、B組中選取10例，標本取得后在2分鐘內(nèi)立即投入戊二醛中行固定，樹脂包埋，用特制的超薄切片機(ultramicrotome)切成超薄切片，再經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛等進行電子染色，而后行電鏡檢查。電鏡下觀察神經(jīng)纖維情況。評價兩組間是否存在差異情況。結(jié)果1HE染色三組樣本：手術(shù)切除的腎盂輸尿管連接處狹窄段(實驗組A組)3l例；同一患兒輸尿管手術(shù)切緣(對照組B組)3l例；產(chǎn)前排除泌尿系異常的32周以上引產(chǎn)或死