惡性高熱RYR1基因突變的研究.pdf

1、目的:通過對(duì)唇腭裂患者及正常人RYR1基因上c.1077、c.1668、c.2286、c.2943、c.7281五個(gè)位點(diǎn)的基因測(cè)序，并與NCBI的SNP數(shù)據(jù)庫比對(duì)，研究臨床確診惡性高熱患者的五個(gè)突變位點(diǎn)c.1077T＞C、c.1668G＞A、c.2286G＞T、c.2943G＞A、c.7281C＞T是否有遺傳學(xué)意義，為下一步進(jìn)行導(dǎo)致惡性高熱的RYR1鈣通道蛋白的研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:RYR1基因上c.1077、c.1668

2、、c.2286、c.2943、c.7281五個(gè)位點(diǎn)為研究對(duì)象，1例臨床確診惡性高熱患者RYR1基因序列作為實(shí)驗(yàn)組，50例唇腭裂患者及50例正常人的RYR1基因序列為對(duì)照組。從對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞中抽提DNA，PCR擴(kuò)增后測(cè)序RYR1基因的五個(gè)位點(diǎn)c.1077、c.1668、c.2286、c.2943、c.7281。將測(cè)序結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析后與NCBI的SNP數(shù)據(jù)庫相比對(duì)，分析上述五個(gè)位點(diǎn)是否有遺傳學(xué)突變意義。
　　 結(jié)果:在UCSC正

3、常人基因序列對(duì)照下，唇腭裂組c.1077、c.1668、c.2286、c.2943、c.7281突變率分別為100％、80％、74％、72％、2％，正常人群組c.1077、 c.1668、 c.2286、 c.2943、 c.7281突變率分別為100％、80％、68％、84％、0％。NCBI的SNP數(shù)據(jù)庫查詢結(jié)果c.1668G＞A、c.2286G＞T、c.2943G＞A、c.7281C＞T突變率分別30％、87.6％、85.8％、0.

4、5％，c.1077T＞C未見報(bào)道。唇腭裂組15#患者存在c.7281C＞T純合突變，但接受全麻手術(shù)后未出現(xiàn)惡性高熱。
　　 結(jié)論:黃種人c.1668G＞A、c.2286G＞T、c.2943G＞A是SNP位點(diǎn)，可引起單核苷酸多態(tài)性;c.7281C＞T不是SNP位點(diǎn)，遺傳學(xué)上認(rèn)為與惡性高熱的發(fā)生可能有關(guān)，結(jié)果與NCBI的SNP數(shù)據(jù)庫一致。黃種人c.1077T＞C的突變率為100％，且SNP數(shù)據(jù)庫未收錄該位點(diǎn)，故CC可能為黃種人c.1