骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)內(nèi)細菌群落的解析.pdf

1、目的：通過基于16S rDNA克隆文庫技術(shù)分析骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)內(nèi)細菌群落的分布情況，初步探討細菌在OA發(fā)病中的作用。
　　方法：選取26例于我院行關(guān)節(jié)置換術(shù)或關(guān)節(jié)鏡手術(shù)的骨關(guān)節(jié)炎患者，根據(jù)病情輕重分成重度組(n=20)和輕度組(n=6)，比較兩組血液學炎性指標及關(guān)節(jié)液炎癥因子水平;術(shù)中抽取患者關(guān)節(jié)液樣本，提取樣本基因組DNA，通過PCR技術(shù)特異性擴增細菌16S rDNA片段;對其16S rDNA片段構(gòu)建克隆文庫并測序，測序結(jié)果與N

2、CBI基因組數(shù)據(jù)庫進行匹配，確定對應的細菌;結(jié)合末端限制性片段長度多態(tài)性分析技術(shù)，分析每個樣本所含有的細菌種類，通過主成分分析比較兩組間細菌群落構(gòu)成存在的差異。
　　結(jié)果：血沉、高敏C反應蛋白和間質(zhì)金屬蛋白酶-9在兩組間無統(tǒng)計學差異，重度組關(guān)節(jié)液中腫瘤壞死因子-α和自細胞介素-1β濃度明顯高于輕度組;26例患者的關(guān)節(jié)液樣本均能PCR擴增出細菌16S rDNA目的片段;共有25種細菌序列可以與數(shù)據(jù)庫現(xiàn)有序列相匹配，其中含量最多的三種

3、菌分別屬于Aquabac terium fon tiphilumstrain、不動桿菌屬和痤瘡丙酸桿菌;主成分分析發(fā)現(xiàn)兩組間細菌群落構(gòu)成存在差異，重度組痤瘡丙酸桿菌、食烷菌、Aggregatibacter aphrophilus strain和Alphaproteobacterium的相對含量較輕度組稍高，而輕度組無色脫氮桿菌和弧形莖菌的相對含量較重度組稍高。
　　結(jié)論：OA患者的關(guān)節(jié)內(nèi)可能存在Aquabacterium font