嘧菌酯對(duì)辣椒炭疽菌（Colletotrichum capsici）的毒力及分子毒理學(xué)研究.pdf

1、嘧菌酯(Azoxystrobin)是由先正達(dá)公司(原捷利康)開(kāi)發(fā)的，也是第一個(gè)商品化的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，具有殺菌活性高，防病譜廣，與環(huán)境相容性好等突出優(yōu)點(diǎn)。甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑作用于真菌線粒體電子傳遞鏈的復(fù)合物Ⅲ，阻斷電子傳遞，干擾能量合成，因其通過(guò)與細(xì)胞色素b(cyt b)的Qo部位結(jié)合而稱之為Qo抑制劑(QoI)。由于其獨(dú)特的作用機(jī)制，與已有的所有殺菌劑無(wú)交互抗藥性。但已有研究表明多種植物病原真菌對(duì)該類藥劑產(chǎn)生抗藥性自發(fā)突變

2、頻率較高，在高選擇壓下自然界易形成抗藥性病原真菌群體。 辣椒炭疽病(Colletotrichum capsici，C.gloeosporioides)是中國(guó)辣椒生產(chǎn)上的嚴(yán)重病害。但長(zhǎng)期以來(lái)一直缺乏防治辣椒炭疽病的有效藥劑，尋找新型高效殺菌劑來(lái)控制辣椒炭疽病的流行已成為化學(xué)防治工作者的目標(biāo)。所以研究辣椒炭疽病菌對(duì)嘧菌酯的敏感性及其在嘧菌酯處理下藥物靶標(biāo)在生化和基因水平上的毒理學(xué)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 離體培養(yǎng)條件下，嘧菌酯單

3、獨(dú)作用對(duì)辣椒炭疽菌的菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑制作用弱。旁路氧化在辣椒炭疽菌野生菌株的孢子萌發(fā)中提供大于95倍生理功能的補(bǔ)償作用；在菌絲生長(zhǎng)中提供20～35倍的補(bǔ)償作用。嘧菌酯抑制辣椒炭疽菌孢于產(chǎn)生和黑色素形成。 通過(guò)噴霧、涂抹、針刺3種方法接種感病甜椒幼苗和紅熟果實(shí)，結(jié)果表明，多針刺孔接種甜椒紅熟果實(shí)發(fā)病效果最好，故采用多針刺孔的方法接種甜椒紅熟果實(shí)以測(cè)定嘧菌酯防治辣椒炭疽病的保護(hù)和治療作用。嘧菌酯對(duì)防治辣椒炭疽病有較理想的保護(hù)和

4、治療作用。在藥劑處理后間隔1d接種，10μg/L嘧菌酯的防治效果即達(dá)到95.5％；接種病菌間隔1 d后藥劑處理，10μg/L嘧菌酯對(duì)其防效為85％。嘧菌酯還有良好的抗擴(kuò)展和抗產(chǎn)孢作用。用嘧菌酯處理過(guò)的病斑產(chǎn)生的分生孢子萌發(fā)活力和致病力下降。 在海南省五點(diǎn)采樣分離到的78株炭疽病菌中， 94.9％為膠胞炭疽菌，5.1％為辣椒炭疽菌。在室內(nèi)采用孢子萌發(fā)法測(cè)定了所有菌株對(duì)嘧菌酯的敏感性。結(jié)果嘧菌酯對(duì)辣椒炭疽菌(Colletotrich

5、um capsici)的毒力及分子毒理學(xué)研究未檢測(cè)到抗性菌株，并且辣椒炭疽病菌在數(shù)次施用嘧菌酯后敏感性雖略有下降，但差異不顯著。對(duì)嘧菌酯最耐藥和最敏感的DD1-61和T-53菌株的無(wú)性單孢后代對(duì)嘧菌酯的敏感性均出現(xiàn)分離，但這兩個(gè)后代群體對(duì)嘧菌酯的敏感性存在明顯的差異，這表明兩個(gè)親本菌株間確實(shí)有差異。 10μg/mL嘧菌酯處理1h對(duì)辣椒炭疽菌菌絲呼吸耗氧有良好的抑制作用。但隨處理時(shí)間延長(zhǎng)，藥劑對(duì)菌絲耗氧的抑制作用減弱。研究證明延

6、長(zhǎng)處理時(shí)間呼吸作用對(duì)藥劑的敏感性下降的機(jī)理不是旁路氧化途徑增強(qiáng)，也不是基質(zhì)中藥劑效力的下降或藥劑已被飽和。測(cè)定嘧菌酯處理0、1、12、48h細(xì)胞色素b基因的轉(zhuǎn)錄水平，結(jié)果表明，藥劑處理1h后，細(xì)胞色素b基因的轉(zhuǎn)錄水平迅速下降，但12h后增強(qiáng)，甚至在48h時(shí)mRNA的量高于對(duì)照，與呼吸作用測(cè)定結(jié)果相符，這表明藥劑處理后對(duì)菌絲呼吸作用的抑制的變化與mRNA的轉(zhuǎn)錄水平有關(guān)。測(cè)定嘧菌酯處理0、1、12、48h旁路氧化酶基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平，結(jié)

7、果表明，藥劑作用12h后旁路氧化酶基因轉(zhuǎn)錄水平顯著降低，但當(dāng)藥劑作用48h后，旁路氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄水平得到恢復(fù)，甚至與對(duì)照的無(wú)明顯差別。 嘧菌酯對(duì)黃瓜灰霉病菌、水稻紋枯病菌、稻瘟病菌的菌絲生長(zhǎng)，對(duì)黃瓜灰霉病菌和稻瘟病菌的孢子萌發(fā)、孢子產(chǎn)生，對(duì)水稻紋枯病菌的菌核生成有抑制作用，對(duì)稻瘟病菌的黑色素形成有延緩作用。SHAM對(duì)嘧菌酯的毒力有顯著的增效作用。菌絲耗氧率測(cè)定表明嘧菌酯對(duì)水稻紋枯病菌的呼吸始終有抑制作用，對(duì)稻瘟病菌和黃瓜灰霉病