嗜酸乳桿菌發(fā)酵棉粕中細(xì)菌素的研究.pdf

1、本研究以嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)為出發(fā)菌種,篩選出高產(chǎn)細(xì)菌素性能的嗜酸乳酸菌,并對(duì)細(xì)菌素生物學(xué)特性及其分離純化進(jìn)行研究,然后以嗜酸乳桿菌分別發(fā)酵棉粕、豆粕,比較發(fā)酵后細(xì)菌素的活性。并研究嗜酸乳桿菌發(fā)酵棉粕飼料中無(wú)機(jī)離子及不同干燥和保存方法對(duì)細(xì)菌素活性的影響。本論文由以下四個(gè)試驗(yàn)組成。
　　試驗(yàn)一:通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室3株嗜酸乳桿菌菌株的抑菌特性檢測(cè),嗜酸乳桿菌J2的發(fā)酵液在排除有機(jī)酸和過(guò)氧化氫的干擾

2、情況下,仍具有較高的抑菌活性,說(shuō)明發(fā)酵液中還有其它活性物質(zhì)的存在。用蛋白酶處理發(fā)酵液后抑菌活性明顯下降,說(shuō)明這種抑菌物質(zhì)具有蛋白質(zhì)性質(zhì),為細(xì)菌素的一種。
　　試驗(yàn)二:采用瓊脂擴(kuò)散法,旨在對(duì)嗜酸乳桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素的生物學(xué)特性進(jìn)行研究。研究表明,該細(xì)菌素具有良好的熱穩(wěn)定性,可耐受121℃處理30 min;有效pH范圍(3.0~6.0);可不同程度的耐受多種有機(jī)溶劑;對(duì)多種蛋白水解酶敏感(胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,蛋白酶K和菠蘿蛋白酶),但對(duì)

3、胃蛋白酶敏感性低;抑菌譜廣,對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌以及大腸桿菌、沙門氏菌等革蘭氏陰性細(xì)菌具有顯著的抑制作用。
　　試驗(yàn)三:旨在對(duì)嗜酸乳桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素進(jìn)行分離純化研究。研究表明,采用60％的硫酸銨鹽析、Sephadex G-50層析可得到初步純化的細(xì)菌素,其比活力為386.3 AU/mg,純度提高了25.08倍,最終得率為26.99%;Tricine-SDS-PAGE凝膠電泳估測(cè)出細(xì)菌素的分子量大小在7800

4、-14400 u之間。
　　試驗(yàn)四:本試驗(yàn)將在原有研究基礎(chǔ)上,進(jìn)行嗜酸乳桿菌發(fā)酵棉粕、豆粕中細(xì)菌素活性的對(duì)比研究,并探索中無(wú)機(jī)離子及不同干燥和包裝方法對(duì)細(xì)菌素活性的影響。結(jié)果表明:
　?、爬檬人崛闂U菌發(fā)酵不同底物對(duì)細(xì)菌素活性變化無(wú)顯著影響。
　　⑵底物微量元素添加量的優(yōu)化結(jié)果為:X1(硫酸鎂)0 mg/kg、X2(檸檬酸三銨)275 mg/kg、X3(硫酸錳)2.5 mg/kg、X4(磷酸氫二鉀)270 mg/kg。