嗜酸乳桿菌細(xì)菌素Lactobacillin XH1分離純化及特性研究.pdf

1、乳酸菌（Lactic acid bacteria）LAB細(xì)菌素（Bacteriocins）是乳酸菌在代謝過(guò)程中通過(guò)核糖體合成機(jī)制產(chǎn)生的一類具有抑菌活性的多肽、蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合物?？梢砸种破渌锾m氏陽(yáng)性菌，如乳球菌、葡萄桿菌、李斯特菌等，對(duì)大多數(shù)的革蘭氏陰性菌、真菌等沒(méi)有抑制作用。目前能夠產(chǎn)細(xì)菌素的乳酸菌包括乳球菌、鏈球菌、乳酸桿菌、明串珠菌、片球菌和腸球菌屬，這些益生菌不僅可以改善腸道生態(tài)，而且是一類具有潛在開(kāi)發(fā)能力的天然食品防腐劑和

2、飼料添加劑，乳酸菌細(xì)菌素已成為天然防腐劑研究與開(kāi)發(fā)應(yīng)用的熱點(diǎn)。
　　本研究旨在從實(shí)驗(yàn)室保藏的一株嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)La-XH1分離純化細(xì)菌素，進(jìn)而對(duì)其理化特性、抑菌機(jī)理進(jìn)行分析研究。
　　1.采用平板挖井?dāng)U散法，在排除了有機(jī)酸、過(guò)氧化氫等影響的前提下，從抑菌活性、熱穩(wěn)定性、最適pH值及蛋白酶的敏感性等方面探討嗜酸乳桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素Lactobacillin XH1的生物特性。結(jié)果表

3、明，Lactobacillin XH1對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、炭疽桿菌都有較強(qiáng)的抑制作用，是一種廣譜性抑菌物質(zhì)；在pH1.0～5.0具有活性，在121℃處理20min其活性基本不變，具有一定熱穩(wěn)定性；對(duì)胰蛋白酶、胃蛋白酶及木瓜蛋白酶有敏感性，而對(duì)蛋白酶K及中性蛋白酶敏感性差。
　　2.試驗(yàn)采取氯仿萃取和硫酸銨梯度沉淀（由飽和度60％升至80％，收集沉淀，水溶濃縮）兩種方法對(duì)嗜酸乳桿菌細(xì)菌素Lactobacillin XH1粗提

4、，得到的粗提液抑菌效果明顯，濃縮后的粗提液經(jīng)cellufine A-500填料柱在核酸蛋白純化系統(tǒng)上進(jìn)行離子交換純化，收集具有抑菌活性的組分，濃縮測(cè)定出細(xì)菌素抑菌效價(jià)和比活力均顯著增強(qiáng)， Tricine-SDS-PAGE電泳測(cè)得Lactobacillin XH1分子量在14.4～20.1 kDa范圍內(nèi)。
　　3.以大腸桿菌為指示菌，對(duì)嗜酸乳桿菌細(xì)菌素Lactobacillin XH1的抑菌機(jī)理進(jìn)行了探討。結(jié)果表明，嗜酸乳桿菌細(xì)菌素