大黃魚(yú)選育群體SSR遺傳多樣性分析、耐低溫分子標(biāo)記篩選和耐低溫基因CIRP表達(dá).pdf

1、大黃魚(yú)（Pseudosciaena crocea）隸屬鱸形目、石首魚(yú)科、黃魚(yú)屬，是我國(guó)重要的海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖魚(yú)類。因浙江養(yǎng)殖海區(qū)冬季水溫較低，每年有大黃魚(yú)被凍死，養(yǎng)殖戶每年或多或少有經(jīng)濟(jì)損失。為此，項(xiàng)目組成員通過(guò)人工選育獲得了耐低溫能力強(qiáng)的大黃魚(yú)“東海1號(hào)”。本研究針對(duì)該大黃魚(yú)選育群體進(jìn)行遺傳多樣性分析和耐低溫相關(guān)分子標(biāo)記篩選，以及克隆耐低溫基因CIRP并分析其在低溫脅迫下的組織表達(dá)情況。
　　遺傳多樣性分析表明，選育群體的平均觀測(cè)雜

2、合度、平均期望雜合度和多態(tài)信息含量分別為0.681、0.657和0.596，表明其遺傳多樣性較高，具備進(jìn)一步遺傳育種的潛力，但應(yīng)給與保護(hù)，避免遺傳多樣性進(jìn)一步丟失。選育群體中兩個(gè)不同低溫耐受群體的平均等位基因數(shù)為4.454~4.546，平均觀測(cè)雜合度為0.677~0.685，平均期望雜合度為0.653~0.661，多態(tài)信息含量為0.591~0.601，兩個(gè)群體間的遺傳多樣性水平相當(dāng)，表明耐低溫性狀差異可能不會(huì)導(dǎo)致群體間的遺傳分化。

3、>　　微衛(wèi)星分析結(jié)果顯示，標(biāo)記 KPC43在選育群體的2組大黃魚(yú)樣品中擴(kuò)增出2個(gè)差異顯著的等位基因（片段大小分別為170 bp和150 bp），其中KPC43170bp差異等位基因在低溫耐受組中出現(xiàn)的頻率顯著高于低溫敏感組，與耐低溫性狀存在極顯著的正相關(guān)（P<0.01），相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.498**；KPC43150bp差異等位基因在低溫敏感組中出現(xiàn)的頻率顯著高于低溫耐受組，與耐低溫性狀存在極顯著負(fù)相關(guān)（P<0.01），相關(guān)系數(shù)達(dá)到-0.

4、417**。表明這2個(gè)差異等位基因可能與某種耐低溫基因存在一定的連鎖關(guān)系。對(duì)這2個(gè)差異等位基因進(jìn)行序列比對(duì)發(fā)現(xiàn) KPC43170bp在核心序列位置比KPC43150bp多了10個(gè)（TG）重復(fù)，由此推測(cè)可能是不耐低溫個(gè)體（TG）重復(fù)次數(shù)較少而影響了某個(gè)耐低溫基因的表達(dá)活性，從而影響其耐低溫能力。
　　基因克隆結(jié)果顯示，大黃魚(yú)CIRP基因cDNA序列全長(zhǎng)1211 bp（含polyA尾），含一個(gè)較小的開(kāi)放閱讀框，編碼182個(gè)氨基酸。RT