炙甘草對哮喘大鼠氣道炎癥及STAT-6信號通路的影響.pdf

1、目的:本研究基于導(dǎo)師史鎖芳教授臨床配伍運用大劑量甘草治療哮喘取得較好療效的基礎(chǔ)，從實驗角度進一步驗證不同劑量炙甘草對OVA致大鼠哮喘模型癥狀積分、氣道反應(yīng)性、支氣管病理、血清細(xì)胞因子、肺組織pSTAT-6免疫組化及肺組織STAT-6、commonSTAT-6、STAT-6c RT-PCR表達(dá)的影響。一方面，通過觀察炙甘草對哮喘的治療作用，試析炙甘草治療哮喘的作用機理;另一方面，為導(dǎo)師善于運用大劑量甘草治療哮喘提供分子生物學(xué)佐證，也為藉“

2、量效關(guān)系”理論提高平喘療效提供實驗依據(jù)。
　　方法:清潔級雄性SD大鼠50只，隨機分為:空白組（Control group）、哮喘模型組(OVAgroup)、潑尼松組(Prednisone group)、炙甘草低劑量組(Low dose glycyrrhizae decoctiongroup)、炙甘草高劑量組（High dose glycyrrhizae decoction group），每組10只。除空白組外，其余各組通過腹腔注

3、射OVA、AlO3H3、滅活百日咳桿菌致敏，及OVA霧化誘喘，建立哮喘大鼠模型;空白組給予生理鹽水腹腔注射及蒸餾水霧化作為對照。建立模型后，各組分別給予相應(yīng)的藥物灌胃。通過哮喘行為學(xué)評分評估模型癥狀，乙酰膽堿霧化誘喘間接評價氣道反應(yīng)性，肺組織HE染色觀察病理損傷程度，ELISA法檢測血清IgE、IL-13、IFN-γ濃度變化，通過免疫組化了解肺組織pSTAT-6表達(dá)，RT-PCR檢測STAT-6、commonSTAT-6、STAT-6c

4、的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:①本實驗采用的方法所建立的大鼠哮喘模型符合哮喘動物模型的基本特點，我們認(rèn)為本模型符合要求;②統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)顯示:炙甘草高劑量組能顯著改善哮喘大鼠的癥狀、降低氣道反應(yīng)性，同時改善支氣管病理損傷，療效顯著優(yōu)于炙甘草低劑量組及哮喘模型組;③炙甘草高劑量組大鼠血清IgE、IL-13水平較哮喘模型組降低，IFN-γ濃度較哮喘模型組升高均顯示出明顯的差異，炙甘草低劑量組與哮喘模型組比較差異不顯;④免疫組化結(jié)果顯示:炙甘草

5、高劑量組pSTAT-6的表達(dá)與哮喘模型組比較具有顯著的抑制作用，炙甘草低劑量組與哮喘模型組比較則未能顯示出統(tǒng)計學(xué)差異;⑤STAT-6不同亞型的RT-PCR結(jié)果顯示:炙甘草高劑量組對STAT-6的表達(dá)具有顯著的抑制作用，其上調(diào)STAT-6c，下調(diào)STAT-6、common STAT-6的作用較哮喘模型組均有顯著差異，而炙甘草低劑量組對STAT-6不同亞型的表達(dá)與模型組比較差異不顯。
　　結(jié)論:①炙甘草在高劑量時具有改善哮喘癥狀、降低

6、氣道反應(yīng)性、減輕哮喘氣道病理損傷，抑制IgE、IL-13生成，促進IFN-γ產(chǎn)生，降低肺組織pSTAT-6表達(dá)，上調(diào)STAT-6c，下調(diào)STAT-6、common STAT-6的作用。②炙甘草治療哮喘的作用與其能調(diào)節(jié)STAT-6的轉(zhuǎn)錄，增強抑制性STAT-6c表達(dá)，抑制STAT-6表達(dá)，降低IgE水平，調(diào)節(jié)Th1/Th2免疫應(yīng)答有關(guān)。③炙甘草自身的性味歸經(jīng)及功效是其治療哮病的基礎(chǔ)，其調(diào)和緩急作用在哮病的綜合治療中發(fā)揮了重要作用。④本研究