吳茱萸堿對(duì)APPswe-PS△E9轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠模型的治療作用及機(jī)理研究.pdf

1、背景:阿爾茨海默病是老齡化社會(huì)人類健康的主要威脅之一,目前,阿爾茨海默病(AD)的臨床治療仍然面臨沒有幾種有效藥物可以選擇的困境,雖然有些藥物可以暫時(shí)提高阿爾茨海默病患者的認(rèn)知能力,但還沒有一種治療方法能夠完全抑制或逆轉(zhuǎn)阿爾茨海默病的神經(jīng)退行性變進(jìn)程。研究AD的發(fā)病機(jī)制,尋找能有效阻止AD發(fā)展進(jìn)程的新藥,及藥物靶點(diǎn)是神經(jīng)退行性變領(lǐng)域的艱巨任務(wù)之一。近年來,中醫(yī)藥在治療老年癡呆方面的研究,取得很大的進(jìn)步,已經(jīng)成為一個(gè)不可忽視的力量。本文從

2、對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有較好療效的中藥單體中挑選出12種,利用APPswe/PSΔE9轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠模型,篩選得到可改善阿爾茨海默病模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的中藥單體吳茱萸堿,我們從多個(gè)層次研究其藥理作用并進(jìn)行機(jī)制的研究。
　　 方法:淀粉樣前體蛋白基因瑞典突變(APPswe)和早老素基因缺失突變基因
　　 (PSΔE9)的雙轉(zhuǎn)基因(APPswe/PSΔE9)小鼠是目前公認(rèn)的癡呆動(dòng)物模型?？焖倮匣托∈缶哂芯坏倪z傳背景和穩(wěn)

3、定的老化病態(tài)特征,是一種比較理性的癡呆模型,選擇5月齡的APPswe/PSΔE9轉(zhuǎn)基因陽性鼠和SAMP8小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并選擇20只5月齡野生鼠和R1小鼠作為對(duì)照組,這些小鼠在性別、體重相匹配,將模型小鼠分為4組:AD模型組、安理申治療組(2 mg/kg/d)、吳茱萸堿治療組
　　 (50 mg/kg/d)、吳茱萸堿治療組(100 mg/kg/d)。模型組及對(duì)照組小鼠給予常規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)鼠糧,安理申治療組和吳茱萸堿治療組在常規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)鼠糧

4、中加入相應(yīng)劑量的藥物,小鼠每天鼠糧的攝入量按下列計(jì)算:每只體重為20g的小鼠,每天攝入鼠糧為3g,給藥治療時(shí)間為28天,給藥后進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)。PET觀察葡萄糖攝取情況,免疫組織化學(xué)檢測(cè)老年斑變化,ELISA檢測(cè)腦組織中細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表達(dá),Western blot檢測(cè)腦組織cox-2,iNOS,p-tau,Aβ寡聚體的表達(dá)。
　　 結(jié)果:水迷宮實(shí)驗(yàn)顯示:吳茱萸堿能夠顯著改善APPswe/PSΔE9轉(zhuǎn)基因

5、阿爾茨海默病小鼠和SAMP8小鼠呈現(xiàn)出的學(xué)習(xí)記憶能力損傷,能夠改善APPswe/PSΔE9轉(zhuǎn)基因和SAMP8小鼠學(xué)習(xí)記憶能力最為有效的藥物劑量為100mg/kg/d。PET觀察腦組織葡萄糖攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,吳茱萸堿能顯著改善APPswe/PSΔE9轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠腦組織能量代謝障礙；吳茱萸堿治療可以降低APPswe/PSΔE9轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠腦組織中增強(qiáng)炎癥的細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF—α的過度表達(dá)；Western

6、 blot結(jié)果顯示,吳茱萸堿治療也可以明顯抑制和炎癥相關(guān)的環(huán)氧化酶-2(COX-2)的表達(dá)。
　　 結(jié)論:在轉(zhuǎn)基因小鼠AD模型和自發(fā)突變小鼠AD模型體內(nèi),吳茱萸堿能夠改善阿爾茨海默病的認(rèn)知功能,并表現(xiàn)出比現(xiàn)在臨床用藥安理申更好的效果,吳茱萸堿可以抑制腦組織中炎癥因子的表達(dá),由于目前公認(rèn)炎癥反應(yīng)是AD病理發(fā)生的因素之一,所以吳茱萸堿對(duì)AD的治療作用是通過抑制腦組織中炎癥因子的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。我們結(jié)果揭示,吳茱萸堿可作為治療阿爾茨海默病