中藥扶正活血化瘀法對(duì)腎間質(zhì)纖維化大鼠腎小管間質(zhì)中ECM代謝影響的初步研究.pdf

1、目的：采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎(UUO)誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化大鼠模型，觀察細(xì)胞外基質(zhì)成分纖維連接蛋白 (Fibronectin，F(xiàn)N)在腎小管損傷及間質(zhì)纖維化過程中的表達(dá)以及中藥扶正活血化瘀法在腎小管損傷及間質(zhì)纖維化過程中的腎保護(hù)作用及可能的作用機(jī)制。 方法：雄性Wistar大鼠30只，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組(Sham group)、模型組(UUO group)、中藥治療組(A group)；假手術(shù)組、模型組于術(shù)前3天開始每天2ml 蒸餾

2、水灌胃給藥；中藥治療組于術(shù)前3天開始每天2ml中藥灌胃給藥；術(shù)后21天處死各組大鼠，收集血清測(cè)定尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平；術(shù)側(cè)腎組織10％中性甲醛溶液固定，石蠟包埋切片，以3μm的石蠟切片，常規(guī)行HE、Masson染色，Masson 染色后進(jìn)行圖像分析以對(duì)腎間質(zhì)纖維化程度進(jìn)行半定量分析，免疫組化半定量檢測(cè)各組大鼠腎組織中 FN 的蛋白表達(dá)。 結(jié)果：1.腎功能結(jié)果：模型組尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平均較假手

3、術(shù)組顯著增加，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)；治療組較模型組呈下降趨勢(shì)，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)。2.肉眼觀察結(jié)果：假手術(shù)組腎臟大小形態(tài)正常，顏色暗紅；模型組結(jié)扎側(cè)腎臟腫大，顏色變淺，有囊性感，內(nèi)含混濁尿液，腎實(shí)質(zhì)變薄。腎組織行 HE 染色結(jié)果顯示：假手術(shù)組腎臟組織結(jié)構(gòu)正常，腎小管排列緊密、整齊，小管基底膜光滑連續(xù)，偶見灶性炎細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組可見彌漫的腎小管上皮細(xì)胞空泡變性、擴(kuò)張、部分萎

4、縮，偶見壞死，腎間質(zhì)增寬，大量的炎細(xì)胞浸潤(rùn)和間質(zhì)纖維化，腎小球病理改變不明顯。治療組上述改變均有所減輕。腎組織行Masson染色結(jié)果顯示：假手術(shù)組腎臟的膠原染色主要位于腎小球基膜、Bowman 囊、系膜區(qū)和腎小管的毛細(xì)血管周圍，而腎小管周圍間質(zhì)部分則比較狹窄；模型組可見腎問質(zhì)增寬、有大量膠原纖維增生，腎小球病變不明顯；治療組上述改變均有所減輕。腎間質(zhì)纖維化圖像分析結(jié)果顯示：腎間質(zhì)膠原染色面積模型組較假手術(shù)組明顯增高，兩組間比較有顯著性差

5、異(P<0.05)，治療組較模型組顯著下降，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05)。3.腎組織免疫組織化學(xué)：纖維連接蛋白(FN)的蛋白表達(dá)分布：假手術(shù)組大鼠腎間質(zhì)有少量表達(dá)，染色為顆粒狀，著色稀疏；模型組表達(dá)明顯增多，呈不均勻顆粒狀，腎小球表達(dá)不明顯；治療組表達(dá)較模型組明顯降低。圖像分析結(jié)果顯示模型組纖維連接蛋白 (FN)免疫組化陽(yáng)性染色面積和積分光密度均較假手術(shù)組明顯上調(diào)，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)；治療組表

6、達(dá)均較模型組降低，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)。4.相關(guān)性分析：纖維連接蛋白 (FN)與腎間質(zhì)纖維化面積均呈顯著正相關(guān)。腎間質(zhì)纖維化面積分別與BUN、Scr 均呈正相關(guān)。 結(jié)論：1.細(xì)胞外基質(zhì)成分纖維連接蛋白(FN)在單側(cè)輸尿管結(jié)扎(UUO)，致腎小管損傷及間質(zhì)纖維化過程中在腎組織中表達(dá)顯著增高。2.扶正活血化瘀法組方中藥能降低單側(cè)輸尿管結(jié)扎 (UUO)大鼠血尿素氮和血肌酐水平，改善了腎功能。3.扶正活血