靈芝三萜組分與紫杉醇聯(lián)合用藥對(duì)HER-2過(guò)表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞增效作用研究.pdf

1、目的：本項(xiàng)目在預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)靈芝三萜組分與紫杉醇對(duì)ErbB2過(guò)表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞有協(xié)同抗增殖活性的基礎(chǔ)上，深入研究靈芝三萜組分對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡的體內(nèi)外增效作用，為進(jìn)一步開發(fā)我國(guó)傳統(tǒng)中藥材靈芝與紫杉醇聯(lián)合治療ErbB2過(guò)表達(dá)的乳腺癌提供臨床前實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)。
　　方法：利用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法在體外檢測(cè)紫杉醇和靈芝三萜組分對(duì)HER-2過(guò)表達(dá)的細(xì)胞SKBR-3的增殖抑制作用。利用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法在體外檢測(cè)紫杉醇和靈芝三萜組分對(duì)

2、HER-2過(guò)表達(dá)的細(xì)胞SK BR-3的增殖抑制作用。利用ComPusyn軟件分析靈芝三萜組分和紫杉醇對(duì)SKBR-3的協(xié)同作用。利用蛋白免疫印跡法檢測(cè)靈芝三萜組分、紫杉醇和兩者聯(lián)合用藥對(duì)HER-2、AKT、EGFR等相關(guān)蛋白通路的影響。通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究靈芝三萜組分和紫杉醇的聯(lián)合用藥對(duì)人乳腺癌細(xì)胞裸鼠移植瘤的抗腫瘤作用。提取動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的瘤塊制成石蠟切片，利用免疫組化法觀察靈芝三萜組分和紫杉醇聯(lián)合用藥對(duì)HER-2蛋白的影響。
　　結(jié)果

3、：體外實(shí)驗(yàn)表明，紫杉醇對(duì)HER-2過(guò)表達(dá)的SKBR-3細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用，靈芝三萜組分對(duì)S K BR-3沒(méi)有明顯的細(xì)胞增殖抑制作用。當(dāng)紫杉醇聯(lián)合靈芝三萜組分之后，對(duì)SKBR-3的增殖抑制作用明顯增強(qiáng)，效果比單用紫杉醇要好。靈芝三萜組分本身對(duì)SKBR-3的蛋白通路不產(chǎn)生影響。靈芝三萜組分能明顯增強(qiáng)紫杉醇對(duì)SKBR-3的細(xì)胞凋亡通路蛋白的表達(dá)作用，并增強(qiáng)PI3K-AKT通路的相關(guān)蛋白的阻斷作用。通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，可以觀察到靈芝三萜組分