冰凍切片聯(lián)合組織印片細胞DNA倍體分析在提高術中乳腺疾病診斷準確率的研究.pdf

1、乳腺腫瘤是女性最常見的疾病之一，由于冷凍乳腺組織鏡下形態(tài)千變萬化，給術中診斷帶來了巨大的挑戰(zhàn)，因此如何提高術中病理診斷的準確率對臨床治療具有重大的意義。本文將探討一種快速Feulgen染色方法并分析術中組織印片細胞DNA倍體在乳腺快速冰凍診斷中的價值，同時探討DNA倍體與Ki-67的表達及臨床病理特征的關系，為乳腺腫物的診斷、術中制定手術方案及評價預后提供一定的理論依據。
　　首先用成年雄性健康SD大鼠的肝臟組織標準印片進行快速F

2、eulgen染色，通過設定不同的實驗溫度和水解時間分析得出適合術中快速Feulgen染色的最佳染色時間及溫度，為術中DNA倍體分析提供準確和標準的實驗方法。我們收集2012年2月-2014年2月間北京市空軍總醫(yī)院病理科術中送檢乳腺標本230例，230例乳腺標本均進行冰凍切片、組織印片快速Feulgen染色并進行DNA倍體分析。將高年資病理醫(yī)師分成兩組：一組由2名醫(yī)師采用雙盲法對冰凍切片進行術中診斷；另一組先由技師將組織印片進行DNA掃描

3、，然后由另兩名醫(yī)師結合術中DNA倍體掃描結果對冰凍切片進行雙盲閱片，做出聯(lián)合診斷，以上術中診斷結果均與術后石蠟切片診斷結果對比分析。術后檢測乳腺組織Ki-67的表達情況，同時收集臨床資料及術后組織病理資料。
　　我們觀察快速Feulgen染色中不同溫度下IOD值可以看出，在60℃和染色時間5min時，DNA含量（IOD值）最大，而且染色效果非常滿意，結構清晰、細胞核染色深、背景著色淡。所以我們用以上染色條件作為本實驗組的Feulg

4、en染色方法。術中送檢的101例良性乳腺標本印片后99例經快速Feulgen染色未掃描到>5C的異倍體細胞，掃描結果為陰性，2例掃描到>5C的異倍體細胞，結果為陽性；129例惡性乳腺標本印片后114例經快速Feulgen染色掃描到數量不等的>5C異倍體細胞，掃描結果為陽性，15例未掃描到>5C的異倍體細胞，結果為陰性；快速Feulgen染色法的DI均值和>5C細胞百分數均值與常規(guī)Feulgen染色法無明顯差異（P>0.05）。230例術

5、中乳腺標本冰凍切片單獨診斷準確率為98.69％，延遲診斷率6.96%。術中冰凍切片結合DNA倍體分析聯(lián)合診斷準確率為99.57%，延遲診斷率1.74%。冰凍切片與聯(lián)合診斷的準確率無明顯差異（P>0.05），而延遲診斷率有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。DNA倍體分析診斷的敏感性、陰性預測值不如冰凍切片診斷（P<0.05）；DNA倍體分析診斷的敏感性、陰性預測值不及冰凍切片聯(lián)合DNA倍體分析的診斷（P<0.05）；二者聯(lián)合診斷的各項診斷指標均

6、比單純冰凍切片診斷高，但均沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。組織學分組中只有纖維腺瘤和導管內乳頭狀瘤的DI均值無統(tǒng)計學意義，其它各組間>5C細胞百分數均值和DI均值比較都有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。隨著Ki-67分級的增加， DNA含量也增加，且DNA倍體含量的增加具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；根據術后組織病理資料分析，DNA含量與組織學分級和淋巴結轉移顯著相關（P<0.05），但DNA含量與患者腫物大小、年齡無關（P>0.05）。<

7、br>　　快速Feulgen染色方法快速，準確，穩(wěn)定，易于自動化操作，具有良好的染色效果，比常規(guī)Feulgen染色法大大縮短了染色時間，可應用于術中冰凍AICM診斷DNA含量與倍體的測量和分析。對于大多數乳腺腫物，AICM-DNA和冰凍切片診斷一致，AICM-DNA可作為術中冰凍切片的一種良好輔助檢測方法。冰凍切片聯(lián)合組織印片細胞DNA倍體能提高術中乳腺冰凍診斷的準確率，測定結果客觀，能提供有價值的診斷依據，應用前景廣闊。DNA含量與乳