三類中藥活性成分與溶菌酶的作用機制及構效關系研究.pdf

1、目的：在模擬人體生理條件下，研究四種呋喃香豆素類藥物補骨脂素(psoralen，PSO)、異補骨脂素(isopsoralen，ISO)、5-甲氧基補骨脂素(5-methoxypsoralen，5-MOP)、8-甲氧基補骨脂素(8-methoxypsoralen，8-MOP)和兩種生物堿類藥物槐果堿(sophocarpine，SC)、氧化槐果堿(oxysophocarpine，OSC)及三種羥基蒽醌類藥物1,2-二羥基蒽醌(1,2-dih

2、ydroxyanthraquinone)、1,4-二羥基蒽醌(1,4-dihydroxyanthraquinone)、1,8-二羥基蒽醌(1,8-dihydroxyanthraquinone)與溶菌酶(lysozyme，LYSO)的相互作用機制，并探討它們之間的構效關系；同時研究了四種稀土離子及金屬離子對三類中藥活性成分與LYSO作用的影響。
　　方法：采用紫外差譜法觀察三類中藥活性成分與LYSO作用前后紫外吸收光譜的變化；利用熒

3、光光譜法獲得三類中藥活性成分與LYSO相互作用的猝滅機制，并求得其相關參數及作用力類型；利用同步熒光光譜法法考察三類中藥活性成分對LYSO構象的影響；另外，運用圓二色譜法考察補骨脂素、異補骨脂素、5-甲氧基補骨脂素和8-甲氧基補骨脂素與LYSO作用前后其二級結構的變化；同時考察四種金屬離子Fe3+、Cu2+、Zn2+和Mg2+及四種稀土離子La3+、Gd3+、Yb3+和Lu3+對三類中藥活性成分與LYSO相互作用的影響。
　　結果

4、：紫外結果初步表明，三類中藥活性成分與LYSO均發(fā)生相互作用；熒光結果表明，三類中藥活性成分均使LYSO熒光強度猝滅，它們對LYSO的熒光猝滅機制均為靜態(tài)猝滅和非輻射能量轉移，作用力類型均為氫鍵和范德華力。三類中藥活性成分與LYSO均形成1:1復合物，且在310K下與LYSO的結合常數K分別為1.02×104、6.95×104、7.05×104、8.60×104、9.22×104、2.81×105、5.51×105、2.01×105和4

5、.05×105L·mol-1；結合距離r分別為4.36、4.75、5.25、5.89、3.81、4.89、4.66、5.15和5.69nm。同步熒光結果表明：三類中藥活性成分均使LYSO的構象發(fā)生不同程度的改變。圓二色譜結果表明：四種呋喃香豆素類藥物與LYSO相互作用后均對LYSO的二級結構產生不同程度的影響。補骨脂素、異補骨脂素、5-甲氧基補骨脂素和8-甲氧基補骨脂素分別使得LYSO中α-螺旋結構的含量降低27.1％、11.5%、10

6、.6%和0.917%。四種金屬離子Fe3+、Cu2+、Zn2+和Mg2+及四種稀土離子La3+、Gd3+、Yb3+和Lu3+的加入對三類中藥活性成分-LYSO的二元體系產生了不同的影響。Fe3+等四種金屬離子以“離子架橋”模式介導三類中藥活性成分與LYSO的作用。稀土離子參與三類中藥活性成分與LYSO作用過程的模式不同，其中La3+和Gd3+以“離子架橋”模式介導，Yb3+和Lu3+以“同位取代”模式介導。
　　結論：三類中藥活性