自體肺移植的基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、第一部分：豬自體肺移植模型的建立及不同灌注液對移植肺損傷的影響 目的： 建立豬自體肺葉移植的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型；觀察不同的肺灌注方法對豬自體肺葉移植術(shù)后肺組織光鏡及超微結(jié)構(gòu)、氧自由基水平、氣體交換能力變化的影響，為臨床開展肺葉移植術(shù)提供參考依據(jù)。 方法： 本地健康雜種豬18只，體重49．7±3．0kg，雌雄不限，隨機(jī)分為對照組（A組）、常溫肝素灌注組（B組）及低溫EC液灌注組（C組）。各組均在全肺切除后立即行自

2、體肺葉移植（左側(cè)全肺切除+左肺下葉自體肺葉移植），對照組不予任何處理，常溫肝素灌注組常溫下予肝素液灌注供肺，低溫EC液組予4℃Euro—Collins液灌注。分別于移植前、移植后0．5h、1h、2h、4h檢測移植肺的肺靜脈血氧分壓（PvO2）、二氧化碳分壓（PvCO2）、肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性（Cdyn）、平均動(dòng)脈壓（mPAP），移植肺組織中的氧自由基髓過氧化物酶（MPO）活性及丙二醛（MDA）含量；移植前、移植后0．5h、1h、2h、4h取移植

3、肺組織，觀察移植肺組織的濕干重比（W/D）、光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果： 1、移植前，移植后0．5h、th、2h，三組移植肺的肺靜脈血PvO2、PvCO2及動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性均無顯著性差異（P>0．05）；隨著再灌注時(shí)間的延長，三組的PvO2及Cdyn下降，而PvCO2上升；與術(shù)前相比，對照組移植后2h的PvO2差異有顯著性（P<0．05），移植后4h的PvO2、PvCO2及Cdyn差異均有顯著性（P<0．05）；與對照組相比

4、，常溫肝素組及低溫EC液灌注組移植后4h的PvO2、PvCO2及Cdyn差異有顯著性（P<0．05）。 2、移植前，移植后1h、2h、4h，三組移植肺的mPAP沒有差異；與術(shù)前相比，對照組術(shù)后0．5h的mPAP有顯著性差異（P<0．05）；與對照組相比，常溫肝素組及低溫EC液組術(shù)后0．5h的mPAP差異有差異性（P<0．05）。 3、移植前，移植后0．5h三組的肺組織中的MDA及MPO的含量沒有差異（P>0．05）；與術(shù)

5、前相比，對照組術(shù)后1h的MPO有顯著性差異（p>0．05），而對照組術(shù)后2h及4h、常溫肝素組及低溫EC液組術(shù)后4h肺組織中的MPO及MDA有非常顯著差異（P<0．01）；與對照組相比，常溫肝素組及低溫EC液組術(shù)后4h的MPO及MDA差異顯著（P<0．05）。 4、移植前，三組肺組織濕干重比、病理光鏡評分、光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)均無顯著差異；與術(shù)前相比，對照組術(shù)后1h，常溫肝素組及低溫EC液組術(shù)后2h的肺濕干重比有顯著差異（P<0．05

6、），對照組術(shù)后2h、4h，常溫肝素組及低溫EC液組術(shù)后4h的濕干重比有非常顯著差異（P<0．01）；與對照組相比，常溫肝素組及低溫EC液組術(shù)后4h的肺干濕重比、病理光鏡評分、光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)有顯著差異（P<0．05）。 結(jié)論： 1、豬自體肺葉移植在技術(shù)上是可行的，豬自體肺葉移植實(shí)驗(yàn)具有較好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性，是評價(jià)肺葉移植后移植肺功能及各項(xiàng)指標(biāo)較為理想的動(dòng)物模型。 2、無論是常溫肝素液還是低溫EC液，對供肺葉的灌注

7、均能較好地保持移植肺的組織結(jié)構(gòu)，減輕肺的缺血再灌注損傷，保護(hù)移植肺的氣體交換功能。 3、常溫肝素灌注后的供肺葉能滿足自體肺葉移植的要求。液 第二部分：豬自體肺葉移植熱缺血時(shí)限的實(shí)驗(yàn)研究 目的： 觀察不同的肺熱缺血時(shí)間對豬自體肺葉移植術(shù)后肺組織結(jié)構(gòu)、氧自由基水平及氣體交換能力變化的影響，明確肺耐受熱缺血的時(shí)限，初步探討其可能機(jī)理，為臨床開展肺葉移植術(shù)提供參考依據(jù)。 方法： 本地健康雜種豬36

8、只，體重49．5±2．3kg，雌雄不限，隨機(jī)分為常溫肝素對照組（B組）、常溫肝素?zé)崛毖?0分鐘組（B1組）、常溫肝素?zé)崛毖?20分鐘組（B2組）、低溫EC液對照組（C組）、低溫EC液熱缺血60分鐘組（C1組）及低溫EC液熱缺血120分鐘組（C2組），其中B組及C組為第一部分所用動(dòng)物。各組均行自體肺葉移植（左側(cè)全肺切除+左肺下葉自體肺葉移植），對照組肺切除后立即予常溫肝素或4℃Euro—Collins液灌注供肺，熱缺血60分鐘組則在缺血6

9、0分鐘后予常溫肝素或4℃Euro—Collins液灌注供肺，熱缺血120分鐘組則在缺血120分鐘后予常溫肝素或4℃Euro—Collins液灌注供肺。分別于移植前，移植后0．5h、1h、2h、4h檢測移植肺的肺靜脈血氧分壓（PvO2）、二氧化碳分壓（PvCO2）、肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性（Cdyn）、平均動(dòng)脈壓（mPAP），移植肺組織中的氧自由基髓過氧化物酶（MPO）活性及丙二醛（MDA）含量；移植前，移植后0．5h、1h、2h、4h取移植肺組織，

10、觀察移植肺組織的濕于重比（W/D），移植前及移植后4h移植肺葉組織光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)變化；測定移植后4h肺靜脈血漿腫瘤壞死因子（TNF—α）及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）—9濃度及移植肺組織中MMP—9含量。 結(jié)果： 1、移植前，移植后0．5h、1h、2h，六組移植肺的肺靜脈血PvO2、PvCO2及動(dòng)脈肺順應(yīng)性均無顯著性差異（P>0．05）；隨著再灌注時(shí)間的延長，各組的PvO2及Cdyn下降，而PvCO2上升；與低溫EC液缺血1

11、20分鐘及常溫肝素對照組相比，常溫肝素120分鐘組移植后4h的PvO2、PvCO2及Cdyn差異有顯著性（P<0．05）。 2、移植前，移植后1h、2h、4h，各組移植肺的mPAP沒有差異；與低溫EC液缺血120分鐘及常溫肝素對照組相比，常溫肝素120分鐘術(shù)后0．5h的mPAP有顯著性差異（P<0．05）。 3、移植前，移植后0．5h各組的肺組織中的MDA及MPO的含量沒有差異（P>0．05）；與低溫EC液缺血120分鐘

12、及常溫肝素對照組相比，常溫肝素120分鐘組術(shù)后2h的MPO有顯著性差異（p>0．05），術(shù)后4h肺組織中的MPO及MDA有非常顯著差異（P<0．01）。 4、移植前，六組肺組織濕干重比、病理光鏡評分、光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)均無顯著差異；與低溫EC液缺血120分鐘及常溫肝素對照組相比，常溫肝素120分鐘術(shù)后2h、4h的濕干重比有非常顯著差異（P<0．01），病理光鏡評分、光鏡及電鏡結(jié)構(gòu)有顯著差異（P<0．05）。 5、移植后4h，

13、與常溫肝素對照組及低溫EC缺血120分鐘相比，常溫肝素缺血120分鐘組的血漿TNF—α、MMP—9濃度有非常顯著差異（P<0．01），肺組織MMP—9陽性評分也有顯著差異（P<0．05）。 結(jié)論： 1．移植肺葉的組織結(jié)構(gòu)破壞、缺血再灌注損傷及氣體交換能力下降程度隨熱缺血時(shí)間延長而加重。 2．至少在60分鐘的熱缺血時(shí)間內(nèi)，單純應(yīng)用常溫肝素液灌注豬的肺葉能滿足移植需要；而在120分鐘內(nèi)，應(yīng)用低溫EC液灌注豬的肺葉也能

14、滿足移植需要。 3．相對于常溫肝素灌注，應(yīng)用低溫EC液灌注移植肺葉效果更好的原因可能是低溫EC液灌注更能抑制血漿TNF—α、MMP—9及肺組織MMP—9濃度的升高。 第三部分：自體肺葉移植術(shù)治療上葉中心型肺癌的臨床研究 目的： 本研究旨在探討臨床應(yīng)用自體肺葉移植技術(shù)根治切除上葉中央型肺的可行性及其益處，比較同期全肺切除術(shù)、支氣管肺動(dòng)脈雙袖狀切除及自體肺移植術(shù)的圍術(shù)期死亡率（30天以內(nèi)）、并發(fā)癥發(fā)生率、生存

15、時(shí)間及肺功能、生活質(zhì)量的差異，并為自體肺移植術(shù)進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供更多經(jīng)驗(yàn)及依據(jù)。 方法： 自2000年8月至2006年8月，自體肺移植病人共7例。5例作雙袖狀左上葉聯(lián)合肺葉切除，2例右上中葉聯(lián)合肺葉切除，因主支氣管或肺動(dòng)脈切除過長，吻合張力過大，遂切斷下肺靜脈，肺短時(shí)間離體后作下葉移植，將下肺靜脈移植在上肺靜脈殘端。選擇2000年8月至2006年8月在我科行支氣管肺動(dòng)脈雙袖狀切除的病人41例，全肺切除術(shù)的非小細(xì)胞肺癌（N

16、CLC）的病人194例。比較三組病人主要的手術(shù)并發(fā)癥，如支氣管胸膜瘺，圍術(shù)期并發(fā)癥，圍術(shù)期死亡率，術(shù)后肺功能、長期生活質(zhì)量以及長期生存時(shí)間。 結(jié)果： 隨訪至2006年8月，7例自體肺移植病人中5例已無瘤存活2—73個(gè)月，生活質(zhì)量良好，1例因術(shù)后2天肺靜脈血栓行重植肺切除，術(shù)后15月死于肺癌復(fù)發(fā)合并呼吸衰竭；另1例術(shù)后31個(gè)月死于肺癌腦轉(zhuǎn)移。自體肺移植組病人預(yù)計(jì)中位生存時(shí)間為71個(gè)月，未發(fā)生吻合口瘺，無手術(shù)死亡。雙袖狀切除

17、組病人支氣管胸膜瘺的發(fā)生率為2．4%（41例中1例），無圍術(shù)期死亡，預(yù)計(jì)中位生存時(shí)間為36個(gè)月。全肺切除組病人支氣管胸膜瘺的發(fā)生率為3．6%（194例中7例），而圍術(shù)期死亡率為2．6%（194例中5例），預(yù)計(jì)中位生存時(shí)間為30個(gè)月。與全肺切除組相比，自體肺移植組和雙袖狀切除組病人的術(shù)后肺功能及生活質(zhì)量存在明顯差異（P<0．05）；與雙袖狀切除組相比，自體肺移植組病人的術(shù)后肺功能及生活質(zhì)量無明顯差異。 結(jié)論： 對心肺功能不