聚羥基丁酸與羥基辛酸在軟骨組織工程中的初步研究.pdf

1、組織工程是應(yīng)用生命科學(xué)與工程學(xué)的原理與技術(shù)，通過(guò)構(gòu)建人體各種組織或器官損傷后的功能和形態(tài)的生物替代物來(lái)修復(fù)受損組織的一門(mén)新興學(xué)科。各種原因引起的關(guān)節(jié)軟骨損傷在骨科臨床上占據(jù)了很大比例，由于關(guān)節(jié)軟骨缺乏血管、神經(jīng)及淋巴組織，自我修復(fù)能力有限。為此，其損傷的修復(fù)日益迫切。軟骨組織工程作為組織工程中活躍的分支其研究為軟骨修復(fù)提供了新的手段，因此，研究開(kāi)發(fā)軟骨組織工程支架的材料和制備方法對(duì)今后軟骨組織缺損修復(fù)具有重要的意義。
　　當(dāng)前軟骨

2、組織工程中研究的重點(diǎn)依然集中在種子細(xì)胞的培養(yǎng)、擴(kuò)增和支架的制備等方面。本文主要進(jìn)行了種子細(xì)胞的培養(yǎng)擴(kuò)增，PHBHOx/ACTM復(fù)合支架的制備，軟骨組織工程支架的表面修飾及支架與細(xì)胞的復(fù)合培養(yǎng)試驗(yàn)。
　　本文用骨髓穿刺法直接從乳兔骨髓中取得細(xì)胞，通過(guò)密度梯度離心法分離到間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)，并利用貼壁法靜置培養(yǎng)原代BMSCs。72h該細(xì)胞的貼壁率達(dá)到60％，144h細(xì)胞鋪滿(mǎn)瓶底，達(dá)到最大的生長(zhǎng)數(shù)量，并成功進(jìn)行了成骨誘導(dǎo)和軟骨誘

3、導(dǎo)。
　　采用溶劑澆鑄-顆粒瀝濾法將具有良好生物相容性和生物可降解性的聚羥基丁酸與羥基辛酸(PHBHOx)為主體材料復(fù)合自行制備的脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)(ACTM)成功制備出孔隙率85％左右，孔徑150-400μm的PHBHOx/ACTM軟骨組織工程復(fù)合支架，掃描電鏡觀察表明，ACTM微粒分布均勻，內(nèi)部孔隙相互連通，基本符合軟骨組織工程支架的要求。
　　采用物理吸附法將濃度不同的多聚賴(lài)氨酸(PLL)引入支架的表面修飾試驗(yàn)，掃描電鏡觀

4、察經(jīng)修飾后的支架其內(nèi)部表面有呈膜結(jié)構(gòu)樣PLL層，修飾支架與為修飾支架的細(xì)胞體外復(fù)合培養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明，未修飾支架對(duì)細(xì)胞粘附率并非隨著ACTM的比例增大而增加，在ACTM含量為10％時(shí)，粘附率達(dá)到最高值68.06％，而修飾后的支架對(duì)細(xì)胞的粘附顯著提高到91.33％，但是隨著細(xì)胞在支架上的生長(zhǎng)和分化，濃度為0.1 mg/mL的PLL修飾后對(duì)復(fù)合支架上細(xì)胞的粘附、生長(zhǎng)和分化最佳。
　　本文試驗(yàn)中，我們成功獲得了乳兔BMSCs并誘導(dǎo)為軟骨細(xì)