2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的:利用堿基淬滅探針技術(shù)建立檢測(cè)編碼α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突變位點(diǎn)的新型診斷方法。
　　方法:(1)方法學(xué)構(gòu)建:引物、探針設(shè)計(jì),探針3'端標(biāo)記6-羧基熒光素,同時(shí)構(gòu)建2個(gè)載體作為陽(yáng)性對(duì)照模板,分別代表兩種可能的純合子基因型,即野生型(342Glu/Glu)和純合突變型(342Lys/Lys)。收集338例病人全血標(biāo)本,離心柱法抽提基因組DNA,PCR擴(kuò)增目的產(chǎn)物,應(yīng)用熔解曲線對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析判斷。(2)方法學(xué)優(yōu)化

2、:優(yōu)化PCR反應(yīng)條件并檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和靈敏性。
　　結(jié)果:熔解曲線分析結(jié)果顯示純合突變型(342Lys/Lys)和野生型(342Glu/Glu)分別在41.38±0.90℃及48.64±1.33℃處出現(xiàn)單一熔解谷;人工構(gòu)建的雜合子(342Glu/Lys)在41.38±0.90℃及48.64±1.33℃處均出現(xiàn)熔解谷。338例病人標(biāo)本均在48.64±1.33℃處出現(xiàn)熔解谷,與野生型陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果一致,即所有標(biāo)本基因型均為342Glu

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