2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、分類號:R75密級:學(xué)位類別:科學(xué)學(xué)位團專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼:10062學(xué)號:2011602785學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)天蚌醬科袁垮T藿AN’|I麓麓纛狂leI蠛封HlVEllSITY碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATIoN論文題目:HsamiR363、HsamiR4235p對HaCaT細胞表達VEGF的調(diào)控研究TITLEAStudyofHsa—miR363、HsamiR4235pRegulatingtheExpressionofVE

2、GFinHaCaTCells一級學(xué)科:臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科:皮膚病與性病學(xué)論文作者:任新新指導(dǎo)教師:劉全忠導(dǎo)師組成員:徐麗敏天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中又捅要目的:探討人工構(gòu)建的hsamiR363和hsa—miR4235P兩條microRNAs對人HaCaT細胞表達血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的調(diào)控作用,預(yù)測hsamiR363和hsamiR4235P在銀屑病領(lǐng)域的應(yīng)用前景。方法:培養(yǎng)人永生角質(zhì)形成細胞(HaC

3、aT細胞株),培養(yǎng)完成后進行細胞鋪板,本次實驗設(shè)有hsamiR一363模擬物組、hsamiR一363抑制物組、hsamiR4235p模擬物組、hsamiR4235p抑制物組、模擬物陰性對照組、抑制物陰性對照組和空白對照組共7組,根據(jù)需要做好復(fù)孔,然后加入轉(zhuǎn)染試劑進行轉(zhuǎn)染,再用MTT法檢測HaCaT細胞增殖活性和細胞轉(zhuǎn)染的成果,實時熒光定量PCR(qRTPCR)檢測轉(zhuǎn)染細胞中VEGF基因的mRNA水平,ELlSA法觀察hsamiR363和

4、hsamiR423—5p對VEGF蛋白表達水平的調(diào)控效應(yīng)。結(jié)果:MTT實驗結(jié)果顯示hsamiR一363模擬物、hsamiR363抑制物、hsamiR4235p模擬物、hsamiR4235p、抑制物、模擬物陰性對照和抑制物陰性對照六組24h、48h、72h的細胞增殖活性有統(tǒng)計學(xué)意義(P005),在光學(xué)顯微鏡下觀察到細胞生長狀態(tài)良好,代表轉(zhuǎn)染效果良好。隨著時間的推移細胞增殖抑制率逐漸升高,到72h時達到最高,同樣代表轉(zhuǎn)染率在72h最高。隨著

5、細胞增殖抑制率達到最高,轉(zhuǎn)染率也達到最高,效果最明顯,細胞也趨于穩(wěn)定,達到最佳狀態(tài),促使各組問差異體現(xiàn)明顯。qRTPCR結(jié)果顯示hsamiR一363模擬物組、hsamiR一363抑制物組、hsamiR4235p模擬物組和hsamiR4235p抑制物組VEGF基因的mRNA表達水平值與空白對照組之間的P值均大于005,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,臣口hsa—miR363模擬物和抑制物、Hsa—miR4235p模擬物和抑制物對VEGF基因的mRNA表

6、達水平無影響。ELISA結(jié)果顯示hsamiR一363模擬物、hsamiR一363抑制物和空白對照組各組間的VEGF蛋白表達水平均有統(tǒng)計學(xué)意義,即hsa—miR363模擬物組的VEGF蛋白表達水平較正常組高,hsamiR363抑制物組的表達水平低,進一步說明hsamiR363可以使HaCaT細胞VEGF信號通路表達上調(diào)。HsamiR423—5P模擬物、hsamiR423—5P抑制物、模擬物陰性對照、抑制物陰性對照和空白對照組各組間的VEG

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