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1、華中科技大學碩士學位論文黑素瘤A375細胞系中cFLIPp43促進NFκB信號通路的活化姓名：陸捷潔申請學位級別：碩士專業(yè)：皮膚病與性病學指導教師：涂亞庭20090501華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文cFLIPp43inducesactivationoftheNFκBsignalingpathwayinmelanomaA375celllineMasterCidate:LuJiejieSupervis:Prof.TuYa
2、tingAbstractObjectiveOurstudyexaminedtheexpressionofcFLIPNFκBp65inhumanmelanomaA375SKMel1celllineonproteinleveltoinvestigatewhethertransfectionofA375celllinewithpCMVTag2BcFLIPp43expressionvectcaninducetheactivationofNFκB
3、signalingpathwaynot.MethodsWeinvestigatedtheproteinexpressionlevelsofcFLIPNFκBp65inhumanmelanomaA375SKMel1cellline.WefurtherconstructedaeukaryoticexpressionvectfcFLIPp43withtheplaspCMVTag2B.ThemonocloneA375cellswithstabl
4、eexpressionofcFLIPp43wereobtainedbyG418ionwereidentifiedwithwesternblot.WeinvestigatedtheproteinexpressionlevelofNFκBp65inA375celllinewithstableexpressionofcFLIPp43.Theimmunofluescencetechnologywasusedtoexaminethenuclear
5、translocationofNFκBp65instabletransfectedA375cellline.ThenwetransfecteddifferentdosesofpCMVTag2BcFLIPp43expressionvectintoA375celllinetheactivationofNFκBsignalingpathwaywasvaluedbytheDualLuciferaseRepterAssaySystem.Resul
6、tsTheproteinexpressionlevelofcFLIPNFκBp65inA375celllinewaslowerthaninSKMel1cellline.WesuccessfullyconstructedA375celllinewhichstablyexpressedcFLIPp43.TheproteinexpressionlevelofNFκBp65washigherinA375celllinewithstableexp
7、ressionofcFLIPp43thaninA375cellline.WiththeenhancementofcFLIPp43proteinexpressiontheamountofnuclearlocationofNFκBp65increased.TheNFκBactivationaugmentedwiththeincreaseofpCMVTag2BcFLIPp43instanttransfectioninA375cellline.
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