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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:
梓葛凍干粉針(Catalpolandpuerarinfreeze-driedpowderforinjection,CPFPI)是本課題組自主研制的治療腦缺血的中藥單體復(fù)方制劑,前期已對(duì)該制劑的制備工藝和對(duì)動(dòng)物腦缺血模型的改善作用進(jìn)行了研究,本文觀察其對(duì)腦缺血的主要證候血瘀證作用,旨在為將其研制成治療腦缺血的中藥新藥奠定主要藥效學(xué)試驗(yàn)基礎(chǔ)。本課題得到重慶市科技攻關(guān)項(xiàng)目(CSTC,2010AC5011)的支持。
2、 目的:
以氣虛血瘀證、陰虛血瘀證和熱毒血瘀證大鼠為模型,觀察梓葛凍干粉針對(duì)3種血瘀證大鼠凝血功能、血液流變學(xué)及NO生成的影響,以探討梓葛凍干粉針的活血化瘀之功效。
方法:
1.造模方法
氣虛血瘀證模型的制備采用饑餓、疲勞、寒濕、驚恐和高脂飲食等方法相結(jié)合復(fù)制氣虛血瘀證模型。每天造模1次,連續(xù)14d。以體重顯著下降、出現(xiàn)氣虛癥狀、血瘀癥狀和血液流變學(xué)指標(biāo)升高為模型成功標(biāo)準(zhǔn)。<
3、br> 陰虛血瘀證模型的制備大鼠肌注氫化可的松注射液10mg·kg-1,連續(xù)14d分別于第14d及第15d取血前1h皮下注射1g·L-1腎上腺素0.5mg·kg-1。
熱毒血瘀證模型的制備除正常組以外,其余各組大鼠給藥7d后,腹腔注射脂多糖500μg·kg-1一次造模,注射脂多糖5h后測(cè)肛溫,24h后采血測(cè)相關(guān)指標(biāo)。
2.分組與給藥
氣虛血瘀證分組與給藥將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、
4、香丹注射液1.05mL·kg-1組以及梓葛凍干粉針16.40mg·kg-1、32.70mg·kg-1和65.40mg·kg-1組,每組10只,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各組用藥前各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著性差異。尾靜脈注射給藥,每天1次,連續(xù)7d。
陰虛血瘀證分組與給藥將正常大鼠按體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、香丹注射液1.05mL·kg-1組以及梓葛凍干粉針16.40mg·kg-1、32.70mg·kg-1和65.40mg·kg-1組,每
5、組10只。于注射氫化可的松注射液第7d開(kāi)始,尾靜脈注射給藥,每天1次,連續(xù)7d。
熱毒血瘀證分組與給藥將正常大鼠按體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、注射賴氨匹林378.00mg·kg-1組、梓葛凍干粉針16.40mg·kg-1、32.70mg·kg-1和65.40mg·kg-1組,每組10只,每天1次,連續(xù)7d。
3.檢測(cè)指標(biāo)
采用玻片法測(cè)定凝血時(shí)間(CT)和斷尾法測(cè)定出血時(shí)間(BT);眼眶采
6、血,分離血漿,測(cè)定凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT);股動(dòng)脈采血,測(cè)定血液流變學(xué)指標(biāo):全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù);分離血清,酶法測(cè)定血清中NO含量。
結(jié)果:
1.梓葛凍干粉針對(duì)氣虛血瘀證模型大鼠的影響
梓葛凍干粉針對(duì)氣虛血瘀證模型大鼠凝血功能的影響與正常組相比,模型組大鼠的CT、BT、PT、APTT和TT顯著
7、縮短(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能極顯著延長(zhǎng)CT(P<0.01),其延長(zhǎng)率為56.10%;梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1組能顯著延長(zhǎng)BT(P<0.05或P<0.01),延長(zhǎng)率分別為26.40%、42.96%;梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善PT、APTT(P<0.05);梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1組能極顯著改善PT、APTT和
8、TT(P<0.05或P<0.01)。
梓葛凍干粉針對(duì)氣虛血瘀證模型大鼠血液流變學(xué)的影響與正常組相比,模型組全血黏度、全血還原黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)和剛性指數(shù)均顯著升高(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善全血黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(P<0.05或P<0.01),梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能顯著改善血液流變學(xué)的各項(xiàng)指標(biāo)(P<0.05或P<0
9、.01)。
梓葛凍干粉針對(duì)氣虛血瘀證模型大鼠NO的影響與正常組相比,模型組NO含量極顯著降低(P<0.01);與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1能極顯著升高氣虛血瘀證大鼠血清中NO的含量(P<0.01)。
2.梓葛凍干粉針對(duì)陰虛血瘀證模型大鼠的影響
梓葛凍干粉針對(duì)陰虛血瘀證模型大鼠凝血功能的影響與正常組相比,模型組PT、APTT和TT均極顯著縮短(P<0
10、.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1組顯著改善PT、APTT和TT(P<0.05或P<0.01)。
梓葛凍干粉針對(duì)陰虛血瘀證模型大鼠血液流變學(xué)的影響與正常組相比,模型組全血黏度、全血還原黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)和剛性指數(shù)均顯著升高(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善全血黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(P<0
11、.05),梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能顯著改善血液流變學(xué)的各項(xiàng)指標(biāo)(P<0.05或P<0.01)。
梓葛凍干粉針對(duì)陰虛血瘀證模型大鼠NO的影響與正常對(duì)照組相比,模型組NO含量極顯著降低(P<0.01);與模型對(duì)照組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1能極顯著提高血清中NO的含量(P<0.01)。
3.梓葛凍干粉針對(duì)熱毒血瘀證模型大鼠的影響
梓葛凍千粉針對(duì)
12、熱毒血瘀證模型大鼠體溫的影響與正常組相比,模型組大鼠造模前后體溫的差值極顯著升高(P<0.01):與模型組相比梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1、65.40mg·kg-1組極顯著降低發(fā)熱大鼠的體溫(P<0.01)。
梓葛凍干粉針對(duì)熱毒血瘀證模型大鼠凝血功能的影響與正常組相比,模型組PT、APTT和TT均顯著縮短(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善TT(P<0.05
13、);梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1組能顯著改善PT和TT(P<0.05或P<0.01)。
梓葛凍干粉針對(duì)熱毒血瘀證模型大鼠血液流變學(xué)的影響與正常組相比,模型組全血黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)和剛性指數(shù)均極顯著升高(P<0.01)。與模型組比較,梓葛凍干粉針32.70mg·kg-1組能顯著改善全血黏度(P<0.05),梓葛凍干粉針65.40mg·kg-1能顯著改善全血黏度、全血還原黏度高切和紅細(xì)胞聚集指數(shù)等指標(biāo)(
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