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文檔簡(jiǎn)介
1、本文對(duì)BAP1在肺腺癌中的表達(dá)與臨床預(yù)后及腫瘤侵襲的相關(guān)性進(jìn)行了研究。本研究分為兩個(gè)部分:
第一部分:BAP1蛋白表達(dá)與肺腺癌臨床預(yù)后的關(guān)聯(lián)分析。
目的:研究BAP1(Breast cancer1-associated protein1)在人肺腺癌與正常肺組織中的表達(dá)差異;研究人肺腺癌組織中BAP1蛋白的表達(dá),及其與各臨床病理學(xué)參數(shù)、臨床預(yù)后之間的關(guān)聯(lián)。
方法:收集我院112例肺腺癌(lung carcin
2、oma,LAC)病例的臨床資料,并進(jìn)行隨訪;收集同期我院101例肺部良性疾病的標(biāo)本。利用免疫組織化學(xué)法(Immunohistochemistry,IHC),檢測(cè)BAP1蛋白表達(dá)情況,利用進(jìn)行分層分析研究其間的關(guān)聯(lián),通過(guò)生存分析評(píng)價(jià)BAP1作為肺腺癌預(yù)后指標(biāo)的可行性。
結(jié)果:BAP1在肺腺癌組織中呈低表達(dá),在正常肺組織中表達(dá)水平較高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001)。BAP1表達(dá)與肺腺癌患者的年齡、性別、大體類(lèi)型、腫瘤最大徑、
3、組織分化程度和組織學(xué)亞型等參數(shù)無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。BAP1蛋白在早期肺腺癌患者(Ⅰ/Ⅱ期)中的表達(dá)較晚期的(Ⅲ期)高(p=0.007),在無(wú)胸膜侵犯的肺腺癌中表達(dá)較有胸膜侵犯的病例高(p=0.004),差異均具有顯著性。另外,BAP1的表達(dá)高低在T分期早期(T1-2)和晚期(T3-4)、N分期早期(N0-1)和晚期(N2-3)、術(shù)后有無(wú)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移等不同情況間也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。生存分析顯示BAP1蛋白高表達(dá)者的無(wú)病生存率和總生存率均優(yōu)于低表達(dá)者,
4、但多因素分析不支持BAP1是肺腺癌患者的獨(dú)立預(yù)后因素。
結(jié)論:BAP1高表達(dá)更多見(jiàn)于T分期、N分期、臨床分期早期的患者,更多見(jiàn)于無(wú)胸膜侵犯的病例,提示BAP1可能影響肺腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。該蛋白高表達(dá)提示肺腺癌患者預(yù)后較好,但作為獨(dú)立預(yù)后指標(biāo),證據(jù)尚不足。
第二部分:BAP1調(diào)控細(xì)胞增殖與遷移的機(jī)制初探。
目的:體外觀察BAP1對(duì)肺腺癌細(xì)胞周期、增殖、侵襲和遷移的調(diào)控作用,初步探究其影響腫瘤細(xì)胞功能的機(jī)制
5、,為肺腺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移治療和靶向藥物研發(fā)提供理想的靶點(diǎn)。
方法:篩選BAP1本底表達(dá)水平不同的肺腺癌細(xì)胞株,分別轉(zhuǎn)染siBAP1和帶有該基因的質(zhì)粒載體,改變BAP1蛋白表達(dá)水平。利用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM),觀察BAP1表達(dá)不同時(shí)細(xì)胞周期、凋亡和壞死的變化。體外增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的改變。利用劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室觀察腫瘤細(xì)胞遷移能力的變化。同期利用Western Blot檢測(cè)BAP1蛋
6、白及周期相關(guān)蛋白、侵襲相關(guān)標(biāo)志物表達(dá)變化的趨勢(shì)。
結(jié)果:BAP1過(guò)表達(dá)能夠促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞周期,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和壞死,但對(duì)細(xì)胞增殖能力無(wú)明顯影響,反之亦然。BAP1蛋白表達(dá)量的變化趨勢(shì)與P27相反,而與周期蛋白CyclinB1相同。在體外,BAP1過(guò)表達(dá)能抑制肺腺癌細(xì)胞的侵襲與遷移能力,而干擾BAP1的表達(dá)能使細(xì)胞侵襲與遷移能力上調(diào)。其表達(dá)變化趨勢(shì)與Vimentin和MMP-2(matrix metalloproteinase-2
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