金釵石斛有效成分對(duì)脂多糖激活星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子的影響.pdf

1、目的：觀察金釵石斛生物總堿、石斛堿、石斛多糖對(duì)外源性內(nèi)毒素脂多糖（Lipopolysaecharide，LPS）激活大鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞（astrocyte，Ac）及誘導(dǎo)其產(chǎn)生和釋放炎性介質(zhì)的影響，重點(diǎn)探討石斛生物總堿對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　 方法：分離、制備新生大鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞，傳代至第三代時(shí)用LPS刺激細(xì)胞，觀察不同濃度的石斛生物總堿（0.025、0.25、2.5 mg/L）、石斛堿（0.025、2

2、.5 mg/L）、石斛多糖（0.025、0.25、2.5 mg/L）對(duì)細(xì)胞激活的影響。通過(guò)MTS檢測(cè)細(xì)胞存活率，試劑盒檢測(cè)NO釋放量，ELISA法檢測(cè)TNF-α、IL-6炎性因子蛋白的表達(dá)，實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)炎癥相關(guān)基因TNF-α、IL-6 mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：1.LPS刺激星形膠質(zhì)細(xì)胞后MTS檢測(cè)吸光度明顯升高，NO含量、TNF-α和IL-6 mRNA及其蛋白表達(dá)均明顯升高，與正常組比較有顯著性

3、差異（P<0.01）；2.石斛生物總堿3個(gè)劑量組的吸光度值均比模型組低，并減少LPS誘導(dǎo)的NO釋放，均降低LPS所致的TNF-α、IL-6基因及蛋白的高表達(dá)（P<0.05）；3.右斛多糖3個(gè)劑量組對(duì)LPS誘導(dǎo)的NO釋放具有改善作用（P<0.05）：石斛堿只有在高劑量時(shí)才能減少LPS誘導(dǎo)的NO釋放。
　　 結(jié)論：1.石斛生物總堿能明顯抑制LPS對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活，減少炎性因子的釋放，提示其具有神經(jīng)保護(hù)作用：2.石斛多糖和石斛堿減