CXCR1及其相關(guān)蛋白與胃癌臨床病理特征的關(guān)系和差異蛋白HSP27的功能驗(yàn)證.pdf

1、目的:
　　研究CXCR1及其相關(guān)蛋白與胃癌臨床病理特征的關(guān)系和HSP27對胃癌的侵襲遷移和凋亡的影響。
　　方法:
　　1.采用免疫組化的方法檢測CXCR1、HSP27、HNRNPK、NM23、KERATIN8、SORCIN在胃癌和癌旁的表達(dá)，統(tǒng)計(jì)分析各因子的表達(dá)情況以及與性別、年齡、分期和是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并進(jìn)一步分析CXCR1與各因子的相關(guān)性。
　　2.構(gòu)建四個(gè)針對HSP27的短發(fā)夾真核表達(dá)載體，將其

2、導(dǎo)入人源性胃癌細(xì)胞MKN45，采用western blotting和real-time-PCR方法篩選出對HSP27基因抑制最強(qiáng)的載體(si-HSP27-MKN45)。將細(xì)胞分成三組，空白組(CON)，對照組(NC)其中NC為轉(zhuǎn)染了熒光無關(guān)序列的siRNA和si-HSP27-MKN45。用劃痕實(shí)驗(yàn)，Transwell實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的遷移，侵襲和凋亡。用western blotting方法檢測三組細(xì)胞的CXCR1的表達(dá)。

3、　　結(jié)果:
　　CXCR1、HSP27、HNRNPK、NM23、KERATIN8、SORCIN六種蛋白陽性表達(dá)在胃癌和癌旁細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，但表達(dá)強(qiáng)度弱程度不一。CXCR1、HSP27、NM23、KERATIN8、SORCIN在癌的表達(dá)強(qiáng)于癌旁組織，差異具有顯著性(P＜0.05);而HNRNPK在癌和癌旁的表達(dá)差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。各個(gè)指標(biāo)的表達(dá)程度在性別和年齡方面都不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。SORCIN、HS

4、P27、HNRNP、CXCR1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，KERATIN8、NM23在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中表達(dá)低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Spearman相關(guān)性分析得出SORCIN、HSP27、HNRNP、 CXCR1與胃癌分期成正相關(guān)(P＜0.05)，NM23、KERATIN8與胃癌分期不具有相關(guān)性(P＞0.05)。分析CXCR1與HSP27、SORCI

5、N、HNRNPK、KERATIN8、NM23的相關(guān)性，結(jié)果表示CXCR1與HSP27、SORCIN、HNRNPK、NM23、KERATIN8的表達(dá)成正相關(guān)性(P＞0.05)。
　　與CON組和NC組相比si-HSP27-MKN45的HSP27的表達(dá)量明顯降低(P＜0.05)，細(xì)胞的遷移，侵襲減弱(P＜0.05)細(xì)胞的凋亡減少。且si-HSP27-MKN45的CXCR1表達(dá)降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.這六

6、個(gè)因子除HNRNPK外在癌的表達(dá)強(qiáng)于癌旁，且都與性別年齡無關(guān)。SORCIN、HSP27、HNRNP、 CXCR1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，KERATIN8、NM23在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中表達(dá)低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者。SORCIN、HSP27、HNRNPK、 CXCR1與胃癌分期成正相關(guān)，NM23、KERATIN8與胃癌分期不相關(guān)。CXCR1與HSP27、SORCIN、HNRNPK、NM23、KERATIN8的表達(dá)成正相