MiR-206調(diào)控LPS介導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究.pdf

1、MicroRNA是一種重要的基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)因子，在細(xì)胞發(fā)育、凋亡、分化，抗病原微生物感染及機(jī)體炎癥反應(yīng)過程中都發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。膠質(zhì)細(xì)胞激活后釋放的促炎性因子在急性或慢性腦部炎癥病程中扮演著重要角色，而有關(guān)mi croRNA參與細(xì)菌脂多糖(LPS)介導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞激活從而誘發(fā)炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)機(jī)制尚待解析。本研究以LPS刺激人星形膠質(zhì)細(xì)胞系U251細(xì)胞誘發(fā)炎癥反應(yīng)為研究模型，從宿主microRNA調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的角度去闡述膠質(zhì)細(xì)胞誘發(fā)炎癥反應(yīng)的

2、分子機(jī)制。
　　具體研究?jī)?nèi)容如下:
　　1.LPS刺激膠質(zhì)細(xì)胞上調(diào)miR-206的表達(dá)及其功能研究我們發(fā)現(xiàn)LPS刺激U251細(xì)胞可以顯著促進(jìn)miR-206的表達(dá)，在LPS處理的U251細(xì)胞中過表達(dá)miR-206可以誘導(dǎo)IL-6、IL-1β和趨化因子CCL5的表達(dá)，而抑制內(nèi)源性miR-206表達(dá)，則顯著減弱IL-6、IL-1β、CCL5和TNF-α的表達(dá)。
　　2.MiR-206的靶基因及其調(diào)控炎癥的作用機(jī)制研究通過生物

3、信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)了負(fù)調(diào)控膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的NR4A2分子可能為miR-206的靶基因。在此基礎(chǔ)上，通過雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)、實(shí)時(shí)熒光定量和蛋白免疫印跡技術(shù)證實(shí)了miR-206確實(shí)靶向NR4A2分子。同時(shí)，進(jìn)一步揭示了miR-206調(diào)控LPS介導(dǎo)的U251細(xì)胞炎癥反應(yīng)是通過靶向NR4A2分子和激活NF-κB信號(hào)通路來實(shí)現(xiàn)的。
　　3.LPS調(diào)控miR-206表達(dá)的機(jī)制研究為進(jìn)一步研究LPS調(diào)控miR-206表達(dá)的分子機(jī)制，我們研究轉(zhuǎn)錄因子在