鹿茸對小鼠急性肝損傷的修復(fù)作用及相關(guān)機理研究.pdf

1、急性肝損傷是臨床常見、多發(fā)的肝臟病患，是各種肝病共同的病理基礎(chǔ)，其病理特點主要為肝細胞變性、壞死，甚至凋亡，其長期存在往往導(dǎo)致肝纖維化，甚至是肝硬化、肝癌發(fā)生的重要的使動因素。因此防治肝損傷是臨床肝病治療的主要環(huán)節(jié)之一，及時控制肝損傷的發(fā)生和發(fā)展對治療肝病將有重要的臨床意義。鹿茸含有多種生物活性成分，有廣泛的藥理作用和醫(yī)療保健功能。在現(xiàn)代醫(yī)療實踐中，以鹿茸為主要原材料制作的藥劑已經(jīng)應(yīng)用于多種疾病的治療，并取得良好的效果，但在肝病治療中尚

2、未得以普遍應(yīng)用。如果將鹿茸應(yīng)用到肝病的治療和保健中，不僅可解決醫(yī)學(xué)上一大難題，而且也可以為鹿茸的開發(fā)帶來巨大的經(jīng)濟效益和社會效益。
　　目前研究已經(jīng)揭示鹿茸對肝損傷確有一定的修復(fù)作用，但對其抗肝損傷的具體作用及作用機理尚不十分清楚。本研究以小鼠為實驗對象，利用CCl4、 APAP、56°白酒以及BCG+LPS幾種毒物制造化學(xué)性、藥物性、酒精性和免疫性四種不同類型的急性肝損傷模型，通過監(jiān)測血清中ALT、AST、TP、ALB、TBil

3、、TG的濃度和肝組織勻漿中MDA、SOD、NO、ADH的含量，來研究以馬鹿茸為原料制備的鹿茸粉和鹿茸醇提物對不同類型肝損傷的修復(fù)作用及相關(guān)機理，旨在從肝細胞損傷、肝臟合成貯備功能、分泌排泄功能、脂代謝功能及脂質(zhì)過氧化幾個方面闡明鹿茸對肝臟的保護作用及部分作用機理，為充分開發(fā)鹿茸新的藥用價值，研制鹿茸抗肝損傷的新型醫(yī)療保健藥物提供生化藥理學(xué)基礎(chǔ)。
　　1.鹿茸對CCl4所致化學(xué)性肝損傷修復(fù)作用的研究結(jié)果表明:
　　對肝細胞損傷

4、的保護作用方面，鹿茸醇提物1.0g/kg、2.0g/kg均可以明顯降低ALT、AST的含量(P＜0.01)，其中醇提物2.0g/kg將ALT由204.08±72.00U/L降至55.21±7.93U/L，AST由234.77±7.71U/L降至80.57±10.80U/L，其降酶作用與聯(lián)苯雙酯(71.25±14.06、79.83±11.02U/L)相當(dāng)。在提高肝臟蛋白合成儲備功能方面，鹿茸醇提物1.0g/kg、2.0g/kg均能明顯提高

5、血清TP(56.94±5.96、59.90±3.89g/L)及ALB(31.80±0.92、31.30±0.72g/L)含量(P＜0.01)，作用效果優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(37.94±5.80、29.18±2.78g/L)，而鹿茸粉效果不顯著。對肝臟排泄分泌功能的改善方面，鹿茸醇提物2.0g/kg能將血清TBil明顯降低至6.35±0.22μmol/L(P＜0.01)，效果與聯(lián)苯雙酯（6.33±0.29μmol/L）相當(dāng)，而鹿茸醇提物1.0g/

6、kg稍差(P＜0.05)。改善肝臟脂代謝功能方面，各治療組均能降低血清TG含量，其中鹿茸醇提物2.0g/kg可將TG由1.03±0.09mmol/L降至0.70±0.12mmol/L，作用效果明顯(P＜0.05)且與聯(lián)苯雙酯（0.87±0.06mmol/L）相當(dāng)。在對抗肝臟自由基的脂質(zhì)過氧化方面，鹿茸醇提物能顯著提高SOD活力、降低MDA和NO水平(P＜0.01)，鹿茸醇提物2.0g/kg作用效果稍好，可將SOD活力提高至78.75±0

7、.56U/mgprot，MDA和NO含量降低至0.93±0.07nmol/mg和40.82±3.73umol/L，而鹿茸粉效果較差。此外，鹿茸能顯著降低肝損傷小鼠的肝重系數(shù)(P＜0.01)，醇提物1.0g/kg組肝重系數(shù)為5.01±0.12，其作用效果較2.0g/kg組(5.16±0.07)稍好，但差異不明顯。
　　2.鹿茸對APAP所致藥物性肝損傷修復(fù)作用的研究結(jié)果表明:
　　對受損肝細胞的保護作用方面，鹿茸醇提物2.0g

8、/kg將ALT、AST分別降至38.38±2.19U/L、36.75±0.92U/L，作用效果優(yōu)于1.0g/kg(41.67±11.56U/L、56.67±8.09U/L)。在蛋白合成儲備功能方面，各治療組TP含量均有小幅升高，其中醇提物1.0g/kg組TP升高至38.17±0.76g/L，鹿茸粉組升高至27.17±0.61g/L，兩組效果均顯著(P＜0.05)，而ALB含量升高幅度較大，醇提物2.0g/kg治療效果最好(P＜0.01)

9、，其ALB含量高達29.86±1.00g/L。在改善肝臟的膽汁瘀滯程度方面，各治療組TBil含量均明顯降低(P＜0.01)，其中鹿茸醇提物2.0g/kg可將TBil降低至8.59±0.27μmol/L，作用效果優(yōu)于醇提物1.0g/kg，但均低于聯(lián)苯雙酯(8.27±0.38μmol/L)。對脂代謝功能的調(diào)節(jié)方面，各治療組TG含量都有大幅度的降低(P＜0.01)，其中鹿茸醇提物2.0g/kg的療效最好，其TG由1.68±0.05mmol/L

10、降至0.86±0.03mmol/L，低于聯(lián)苯雙酯(0.61±0.02mmol/L)。鹿茸各治療組均能在一定程度上提高SOD活力，降低NO和MDA水平，抑制APAP所致受損肝臟的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，但均未達到聯(lián)苯雙酯組中SOD(77.56±2.18U/mgprot)、MDA(0.77±0.06nmol/mg)和NO(45.24±4.39umol/L)水平。鹿茸還能能顯著降低APAP急性肝損傷小鼠的肝重系數(shù)，其中醇提物2.0g/kg組與模型組相

11、比差異極顯著(P＜0.01)，將肝重系數(shù)由6.52±0.23降至5.64±0.11，作用效果較1.0g/kg的明顯。
　　3.鹿茸對酒精性肝損傷修復(fù)作用的研究結(jié)果表明:
　　對減輕肝細胞的損傷程度方面，各組ALT、AST均有不同程度的降低，其中鹿茸醇提物2.0g/kg對AST的降低效果極顯著(P＜0.01)，可將AST由56.00±2.31U/L降至36.42±1.45U/L，結(jié)合ALT和AST綜合判斷，鹿茸醇提物2.0g/

12、kg效果最佳。對改善肝臟的合成儲備功能方面研究發(fā)現(xiàn)，鹿茸對促進TP的合成作用不顯著，而能顯著增加肝臟對ALB的合成功能(P＜0.01)，鹿茸醇提物2.0g/kg作用效果較好，能將其提高至28.71±1.12g/L，僅次于聯(lián)苯雙酯的29.15±0.95g/L。在肝臟對TBil的攝取、結(jié)合和排泄能力方面，鹿茸緩解急性酒精肝損傷小鼠肝臟膽汁瘀滯的程度，給藥后各組TBil含量均大幅降低(P＜0.01)，其中鹿茸醇提物1.0g/kg作用效果最好，

13、使TBil達到10.99±1.55μmol/L，僅次于聯(lián)苯雙酯(9.46±0.11μmol/L)。鹿茸能有效抑制脂肪變性，調(diào)整脂代謝功能，鹿茸醇提物1.0g/kg組和鹿茸粉組可將TG降低至0.80±0.07mmo/L和0.94±0.02mmol/L，作用效果較差，而鹿茸醇提物2.0g/kg能將TG降低至0.65±0.28mmol/L，作用效果極顯著(P＜0.01)，且與聯(lián)苯雙酯(0.61±0.07mmol/L)相當(dāng)。在抗急性酒精肝損傷脂

14、質(zhì)過氧化方面，鹿茸粉作用效果低于鹿茸醇提物，其中醇提物2.0g/kg效果最好，可將SOD活性提高至73.20±0.60U/mgprot，MDA和NO含量降低至1.05±0.07nmol/mg和50.00±3.19umol/L，但均低于聯(lián)苯雙酯。在肝臟對酒精的代謝能力方面，鹿茸能明顯增加肝臟ADH活性，與模型組相比，鹿茸粉可使ADH活性由0.93±0.03U/mg提高至1.11±0.04U/mg(P＜0.05)，其作用效果明顯低于鹿茸醇提

15、物1.0g/kg組的1.42±0.06U/mg和2.0g/kg組的1.52±0.03U/mg(P＜0.01)。此外，鹿茸能有效抑制大量飲酒造成的肝臟重量的增加，鹿茸醇提物2.0g/kg作用效果最好(P＜0.01)，將肝重系數(shù)降至4.99±0.23，作用與聯(lián)苯雙酯相當(dāng)。
　　4.鹿茸對BCG和LPS聯(lián)合所致免疫性肝損傷修復(fù)作用的研究結(jié)果表明:
　　對肝細胞損傷的保護作用方面，鹿茸給藥后ALT、AST均不同程度降低，鹿茸醇提物2

16、.0g/kg可將ALT、AST分別由43.79±1.51U/L、53.50±1.72U/L降至33.33±2.78U/L、39.50±0.93U/L，其對于免疫性肝損傷的保護作用較1.0g/kg稍好而與聯(lián)苯雙酯相當(dāng)，鹿茸粉(37.17±2.20U/L、50.83±5.92U/L)作用最差。在促進肝臟蛋白質(zhì)的合成代謝功能方面，各組TP和ALB均有不同程度的提高，鹿茸醇提物效果高于鹿茸粉，其中醇提物2.0g/kg效果較好，可將TP、ALB分

17、別提高至36.81±0.55g/L、26.62±0.54g/L，但低于聯(lián)苯雙酯(38.35±1.31 g/L、27.61±0.65 g/L)。在改善攝取、轉(zhuǎn)化和排泄TBil的能力方面，給藥后各組TBil含量均極顯著降低(P＜0.01)，鹿茸醇提物2.0g/kg將TBil由17.42±0.74μmol/L降低至8.82±0.20μmol/L，作用效果優(yōu)于其它組，僅次于聯(lián)苯雙酯(7.85±0.51μmol/L)。在調(diào)節(jié)脂代謝功能方面，各組T

18、G含量在用藥后均明顯降低，鹿茸醇提物2.0g/kg降低幅度最大(P＜0.01)，由1.23±0.07mmo/L降至0.87±0.03mmo/L，效果較聯(lián)苯雙酯(0.79±0.03mmo/L)稍差。對抑制脂質(zhì)過氧化方面，鹿茸粉和鹿茸醇提物1.0g/kg提高SOD活力的效果較好，可使SOD值達到75.67±1.63U/mgprot和75.57±1.88U/mgprot，鹿茸醇提物降低MDA的效果優(yōu)于鹿茸粉，其中醇提物2.0g/kg（1.22

19、±0.07nmol/mg）效果略高于1.0g/kg(1.39±0.10 nmol/mg)，而NO的降低效果以鹿茸醇提物1.0g/kg效果最為理想，由61.22±5.14umol/L降低至40.82±6.56umol/L，根據(jù)MDA、SOD和NO綜合分析，鹿茸醇提物1.0g/kg抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的效果較好，但較聯(lián)苯雙酯稍差。此外，鹿茸能抑制免疫性肝損傷造成的肝臟重量的增加，鹿茸粉效果最差，僅由6.22±0.10降至5.97±0.07，鹿茸