Il-1R1對小鼠肝損傷的作用機(jī)理研究.pdf

1、肝臟以其眾多的生理功能和獨(dú)特的再生潛力成為人和動物體內(nèi)最重要的代謝器官。研究表明，肝臟在隨年齡衰老過程中，其功能似乎保持不變，這種功能的保持依賴于肝臟獨(dú)特的再生潛力。近年來，急性肝衰竭患者顯著增加，卻沒有特別有效的治療方法和藥物，尤其對于老年患者來說，急性肝衰竭死亡風(fēng)險(xiǎn)很高。
　　IL-1是體內(nèi)廣泛存在的炎癥因子，IL-1信號對于生物體的損傷和感染應(yīng)答至關(guān)重要。而IL-1信號通路在衰老肝臟功能維持和急性肝損傷修復(fù)過程中的作用尚未見

2、報(bào)道。IL-1R1承擔(dān)介導(dǎo)IL-1幾乎所有的生理功能，其在小鼠尤其是老齡小鼠肝臟損傷后的肝再生中發(fā)揮作用的機(jī)制還沒有進(jìn)行研究。
　　近年來，基因敲除技術(shù)被廣泛的應(yīng)用到功能基因組學(xué)研究。因此，我們引進(jìn)了IL-11R1 KO小鼠，建立了IL-11R1 KO老年小鼠2/3肝切除模型和CCl4誘導(dǎo)的急性肝衰竭模型，從分子水平來研究IL-1R1在衰老肝臟損傷后恢復(fù)過程中發(fā)揮作用的機(jī)理。
　　野生型老年小鼠2/3部分肝切除后6h，IL-

3、1R1 mRNA就達(dá)到表達(dá)高峰，我們猜測IL-1可能通過IL-1R1介導(dǎo)其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來促進(jìn)肝再生的啟動和肝細(xì)胞的增殖。為了深入研究IL-1R1發(fā)揮作用的機(jī)理，我們對早期炎癥因子基因Tnf-a、Emr1、Mcp-1、IL-6、Ccr2和Ifn-γ，即刻早期因子基因Fos和c-Jun，細(xì)胞周期調(diào)控基因Cyclin D1、Cyclin A2、Cyclin B1和增殖標(biāo)志蛋白PCNA以及增殖相關(guān)信號通路信號分子JNK1、NF-κB和STAT3，凋

4、亡通路相關(guān)蛋白Caspase-8、Caspase-3、Bax和Bcl-2進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示在IL-1R1 KO老年小鼠中，F(xiàn)os和c-Jun的表達(dá)在肝再生中后期有明顯下調(diào)和延遲;Cyclin D1表達(dá)量比WT小鼠降低和延遲，PCNA的表達(dá)延遲;IL-1R1 KO老年小鼠的JNK1磷酸化表達(dá)的比例相較于WT老年小鼠有顯著降低，STAT3磷酸化表達(dá)的比例在中后期降低和延遲;Bax表達(dá)在PH后6h有顯著上調(diào)，Caspase-3表達(dá)在PH后1

5、20 h顯著上調(diào)?？偟目磥恚琁L-1R1 KO老年小鼠肝損傷后再生能力降低，主要通過抑制JNK1、STAT3等增殖信號通路的活化來抑制或延遲肝細(xì)胞的增殖和增強(qiáng)Caspase-3和Bax的表達(dá)來促進(jìn)肝細(xì)胞凋亡。
　　CCl4誘導(dǎo)老年小鼠急性肝衰竭后，IL-1R1 mRNA的表達(dá)與Control相比在全過程都極顯著上調(diào)，說明IL-1R1在急性肝衰竭中可能發(fā)揮了重要作用。血清ALT、AST檢測以及組織切片H.E染色結(jié)果表明IL-1R1

6、KO小鼠與WT小鼠有部分差異，隨后對炎癥因子基因Tnf-a、Emr1、Mcp-1、IL-6、Ccr2、Ifn-γ，肝功能標(biāo)志蛋白SOD2、PAFAH1B2、GGT1，凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-3、Bax和Bcl-2，以及谷胱甘肽GSH進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示IL-1R1 KO老年小鼠的TNF-α和Mcp-1的表達(dá)大部分時(shí)間低于WT老年小鼠，Ifn-γ、Ccr2和Emr1的表達(dá)僅在少數(shù)時(shí)間點(diǎn)低于WT老年小鼠;SOD2、PAFA