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文檔簡介
1、目的:通過觀察針刺對SAMP8小鼠海馬神經(jīng)元突觸可塑性及NR2A、NR2B表達的影響,研究針刺對 NMDA受體的影響,從 NMDA受體角度探討針刺促突觸可塑性發(fā)揮、改善學習記憶、治療AD的調(diào)控機制,為針灸促神經(jīng)康復(fù)的可塑性機制提供新的實驗依據(jù)。
方法:以雄性9月齡快速老化模型小鼠(SAMP8)作為AD動物模型,利用Morris水迷宮實驗篩選出學習記憶能力下降的SAMP8小鼠,并將其隨機分為P8針刺組和P8對照組;抗快速老化模型
2、小鼠(SAMR1)作為R1對照組。其中P8針刺組被予以針刺―百會‖、―涌泉‖,每日一次,7日一療程,療程間隔2天,共4療程。相應(yīng)方法取材后,用透射電鏡結(jié)合體視學測量方法觀測小鼠 CA1區(qū)海馬神經(jīng)元突觸界面曲率、突觸間隙寬度、突觸后致密物(PSD)厚度等突觸界面超微結(jié)構(gòu)參數(shù)。用Western Blot蛋白質(zhì)免疫印跡法結(jié)合圖像分析方法檢測小鼠海馬神經(jīng)元NR2A、NR2B的蛋白表達及NR2A/NR2B比值變化。
結(jié)果:
1
3、.學習記憶能力基線分析結(jié)果:P8針刺組和 P8對照組小鼠定位航行實驗平均逃避潛伏期較 R1對照組延長、游泳總路程較 R1對照組增加;空間探索實驗?zāi)繕讼笙抻斡緯r間百分比較R1對照組減低、穿越平臺次數(shù)較R1對照組減少。P8針刺組與P8對照組之間各參數(shù)未見差異。
2.透射電鏡檢測結(jié)果:針刺治療結(jié)束后,P8對照組小鼠CA1區(qū)海馬神經(jīng)元突觸界面曲率較R1對照組下降、突觸間隙較R1對照組增寬、PSD厚度較R1對照組變薄。P8針刺組小鼠CA
4、1區(qū)海馬神經(jīng)元突觸界面曲率較P8對照組增大、突觸間隙較P8對照組變窄、PSD厚度較P8對照組增厚。
3. Western Blot檢測結(jié)果:針刺治療結(jié)束后,與R1對照組比較,P8對照組小鼠海馬神經(jīng)元NR2A相對表達含量呈增高趨勢,NR2B相對表達含量呈降低趨勢,NR2A/NR2B比值呈增高趨勢;與P8對照組比較,P8針刺組小鼠海馬神經(jīng)元NR2A相對表達含量呈下降趨勢,NR2B相對表達含量呈上升趨勢,NR2A/NR2B比值呈下降
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