呼出氣冷凝液中SP-A與肺功能相關(guān)性研究.pdf

1、目的：呼出氣冷凝液(exhaled breath condensate，EBC)成分測(cè)定是近年來(lái)新出現(xiàn)的呼吸道疾病炎癥狀態(tài)檢測(cè)方法。是一種評(píng)價(jià)氣道炎癥和氧化應(yīng)激程度的手段，被稱為生化肺功能，具有無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便、易行、可重復(fù)性等優(yōu)點(diǎn)，肺泡表面活性蛋白A(SP-A)是最早被發(fā)現(xiàn)且在肺泡二型上皮細(xì)胞中表達(dá)最強(qiáng)烈、信號(hào)最豐富的蛋白。SP-A合成和代謝的異常與多種肺部疾病有關(guān)。目前針對(duì)SP-A的檢測(cè)主要是通過(guò)血清、肺泡灌洗液及肺組織檢測(cè)，但血清SP-

2、A檢測(cè)只能間接反映肺部炎癥情況，而肺泡灌洗液和肺組織標(biāo)本獲得困難，這造成目前SP-A的檢測(cè)在臨床中的指導(dǎo)意義十分有限。本研究通過(guò)觀察因肺癌行肺葉切除的患者EBC中SP-A含量、肺組織中SP-A含量、肺功能等因素的相關(guān)性，評(píng)估EBC中SP-A檢測(cè)是否可以反映肺組織中SP-A的含量水平，是否可以反映患者肺功能水平。我們期待通過(guò)該項(xiàng)研究為胸外科圍手術(shù)期患者肺功能的評(píng)價(jià)提供一個(gè)新的方法。
　　方法：選取2012年9月至2013年1月在天津

3、市胸科醫(yī)院住院因肺癌行肺葉切除的患者60例，術(shù)前檢測(cè)肺功能，根據(jù)肺功能將患者分為2組，COPD組28例，非COPD組32例。使用便攜式EBC收集器(RTube)收集EBC，儲(chǔ)存于-80℃冰箱，ELISA法檢測(cè)EBC中SP-A的含量。手術(shù)切除的肺葉標(biāo)本距離病灶5厘米以上取1cm3大小肺組織兩塊，分別進(jìn)行免疫組化(Immunohistochemistry)及免疫印跡法(Western blots)檢測(cè)。用于免疫組化法檢測(cè)的肺組織標(biāo)本使用10

4、％福爾馬林固定，石蠟包埋，制成5微米厚度切片。用于免疫印跡法檢測(cè)的肺組織標(biāo)本立刻儲(chǔ)存于-80℃冰箱。免疫組化法檢測(cè)SP-A(+)肺泡二型上皮細(xì)胞比例(SP-A(+)肺泡二型上皮細(xì)胞數(shù)/肺泡二型上皮細(xì)胞總數(shù)），免疫印跡法測(cè)定SP-A含量。分析EBC中SP-A含量、肺組織中SP-A含量、肺組織中SP-A陽(yáng)性肺泡二型上皮細(xì)胞比例、肺功能等因素之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：1.EBC中可檢測(cè)出SP-A;2.ELISA法及免疫印跡法結(jié)果均顯示CO

5、PD組患者SP-A含量水平低于非COPD患者，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);3.免疫組化顯示，根據(jù)SP-A染色結(jié)果可以將肺泡二型上皮細(xì)胞可分為SP-A(+)細(xì)胞和SP-A(-)細(xì)胞，結(jié)合TTF1染色（所有肺泡二型上皮細(xì)胞TTF1染色均為陽(yáng)性）可計(jì)算出SP-A(+)肺泡二型上皮細(xì)胞比例;4.EBC中SP-A含量與SP-A(+)肺泡二型上皮細(xì)胞比例呈正相關(guān)(r=0.287P=0.026);5.SP-A(+)肺泡二型上皮細(xì)胞比例與FEV1％