茴腦生物催化合成茴香醛及其生物轉(zhuǎn)化體系分析方法的構(gòu)建.pdf

1、本文開展茴腦生物降解過程及其生物轉(zhuǎn)化體系的產(chǎn)物分析方法研究，通過篩選合適微生物菌株，使茴腦選擇性轉(zhuǎn)化為茴香醛，為今后生物法合成茴香醛提供理論基礎(chǔ)。 取得的主要研究成果如下： (1)確定了薄層層析定性檢測(cè)茴腦、茴香醛、茴香酸的方法，分析條件為：展開劑為石油醚∶氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸=25∶10∶3∶0.2(v/v/v/v)，該法能快速檢測(cè)三種化合物。 (2)確立高效液相色譜法定量檢測(cè)茴腦、茴香醛、茴香酸三元混合體系的

2、色譜條件為：流動(dòng)相為乙腈/水/冰醋酸(體積比為70∶30∶0.02)，流速為0.8mL·min-1，檢測(cè)波長為260 nm，該法能準(zhǔn)確定量分析三種化合物。 (3)建立了茴香醛、茴香酸二元體系的紫外分光光度法。利用紫外分光光度法等吸收點(diǎn)確立了茴香醛、茴香酸的定量分析方程分別是p(茴香醛)=A290-0.0064/0.0775，p(茴香酸)=A260-A292/0.0775，該法能簡(jiǎn)便快速準(zhǔn)確定量分析兩種化合物。 (4)創(chuàng)造

3、性地開展了茴腦生物降解微生物篩選。對(duì)八角果、枝和葉，八角樹下土壤、八角中試車間附近土樣及茴油提取廢液進(jìn)行了茴腦生物轉(zhuǎn)化生成茴香醛菌株的篩選，篩選到了具有使茴腦很好降解的ZJ-9菌株，初步鑒定ZJ-9菌株為黑曲霉。對(duì)菌株ZJ-9的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定了黑曲霉ZJ-9發(fā)酵的最佳接種量為孢子數(shù)4.0×105個(gè)；最佳發(fā)酵溫度為30℃；500mL的三口瓶里最佳裝液量100mL；搖床轉(zhuǎn)數(shù)為200r·min-1；初始pH值以6.0為最優(yōu)，培養(yǎng)時(shí)間