有機磷農藥多殘留酶聯免疫吸附分析方法的研究.pdf

1、本研究以建立環(huán)境中有機磷農藥多殘留的酶聯免疫吸附分析(ELISA)方法為目標，設計合成了有機磷農藥通用半抗原，通過結合載體蛋白質制備了通用人工抗原，免疫動物獲得了抗多種有機磷農藥的群特異性抗血清。在所獲得抗體的基礎上，建立了有機磷農藥多殘留ELISA方法。所建立的方法為有機磷農藥的快速多殘留檢測提供了技術手段，具有一定的使用價值和推廣應用前景。主要研究結果如下： 1.通過O,O-二乙基硫代磷酰氯和4-氨基丁酸反應合成了有機磷農藥

2、通用半抗原二乙基-N-(3-羧基丙基)硫逐磷酰胺酯（簡稱DENP），并進行了結構鑒定。 2.采用碳二亞胺法將DENP與牛血清白蛋白（BSA）和雞卵清蛋白（OVA）進行偶聯，制備了通用人工抗原DENP-BSA和包被原DENP-OVA。經鑒定，結合比分別為12︰1和17：1。 3.將通用人工抗原DENP-BSA免疫兩只新西蘭大白兔，采血獲得了針對有機磷農藥的群特異性抗血清，效價分別1：102400和1：25600。

3、4.考察了9種有機磷農藥與抗血清的親和性，發(fā)現與半抗原DENP結構高度相似的甲拌磷、乙拌磷，內吸磷與抗體的親和性最好；與DENP同樣含有直鏈烴結構，但另一端為二甲氧基（硫代）磷酸酯的氧樂果和樂果與抗體的親和性次之；與DENP一樣含有二乙氧基硫代磷酸酯結構，但另一端連接基團為芳環(huán)或雜環(huán)的辛硫磷、二嗪農、喹硫磷及毒死蜱和抗體的親和性較弱。 5.建立了用于檢測甲拌磷、內吸磷的間接競爭ELISA方法的標準曲線，檢測限分別為0.0037m