蛋雞不同發(fā)育階段卵巢與卵泡中ERα和ERβ的表達(dá)和分布研究.pdf

1、禽類卵巢卵泡的發(fā)育是一個復(fù)雜且精細(xì)的過程，不斷經(jīng)歷著卵泡的生長、優(yōu)勢卵泡的選擇和卵泡分化等一系列重要環(huán)節(jié)。另外，卵巢卵泡的發(fā)育又受到內(nèi)分泌、自分泌、旁分泌等多種方式的調(diào)節(jié)。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中，研究禽類卵巢以及卵泡發(fā)育調(diào)控的機(jī)制對于有效地開發(fā)利用卵巢內(nèi)的卵泡資源，提高家禽的繁殖性能，改善蛋禽的產(chǎn)蛋性能，提高生產(chǎn)效率具有重要意義。
　　在卵泡生長過程中，雌激素是一種關(guān)鍵的卵泡內(nèi)調(diào)節(jié)分子，是由顆粒細(xì)胞和卵泡內(nèi)膜細(xì)胞合成的類固醇類激素的一種，

2、具有加快卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞的增殖、增強(qiáng)FSH與黃體生成素LH對卵巢細(xì)胞的增殖與分化產(chǎn)生效應(yīng)的作用，另外雌激素也可以調(diào)節(jié)卵泡的等級發(fā)育?？傊?，雌激素在動物繁殖發(fā)育的過程中起著非常重要的作用，而大多數(shù)的雌激素是通過兩種不同的核內(nèi)雌激素受體ERα與ERβ來發(fā)揮作用的。ERα與ERβ是主要的依賴配體活化轉(zhuǎn)錄因子的蛋白超家族成員，通過參與轉(zhuǎn)錄過程調(diào)控靶細(xì)胞的增殖和分化。
　　目前，ERα與ERβ基因mRNA在雞不同等級卵泡中的表達(dá)情況已有部分研

3、究，但是在不同時(shí)期雞卵巢與卵泡中ERα與ERβ基因mRNA和蛋白的表達(dá)及定位情況尚未見報(bào)導(dǎo)。為了進(jìn)一步了解ERα與ERβ在雞卵泡發(fā)育過程中的潛在作用，運(yùn)用qRT-PCR和Western blotting技術(shù)分別檢測了45、60、90、110、120與160天雞卵巢與卵泡中ERα與ERβ mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示ERα基因mRNA呈現(xiàn)V樣表達(dá)模式，從45天到90天逐漸降低，并且在90天時(shí)最低，從90天到160天逐漸增加。而且45、1

4、60天時(shí)ERα mRNA顯著高于90天，蛋白表達(dá)與mRNA表達(dá)趨勢基本一致。免疫組化分析揭示了45天雞卵巢中ERα主要富集于卵巢初級卵泡的顆粒細(xì)胞層和卵母細(xì)胞，在細(xì)胞膜和細(xì)胞間質(zhì)有少量表達(dá)，而且發(fā)現(xiàn)在卵巢髓質(zhì)層的血管中有一定量表達(dá)證明ERα在血管形成中起作用。在各級卵泡中ERα mRNA和蛋白在SY卵泡中表達(dá)最高，而在SY、F5、F3、F1各級卵泡中呈現(xiàn)逐級遞減趨勢，免疫組化結(jié)果顯示ERα蛋白主要分布在顆粒細(xì)胞層，而且SW、SY卵泡中表

5、達(dá)相對較高，在F5、F3、F1中表達(dá)相對較低。這結(jié)果暗示，在發(fā)育過程中雌激素很可能是通過自分泌／旁分泌形式與ERα結(jié)合進(jìn)行卵巢卵泡功能的調(diào)控。而ERβ mRNA呈現(xiàn)L樣表達(dá)模式，在45天表達(dá)量最高，60天到90天急速下降，90天之后表達(dá)較低并趨于穩(wěn)定，蛋白表達(dá)呈現(xiàn)逐漸降低趨勢。研究顯示ERβmRNA和蛋白在SW到F1的各級卵泡中逐漸降低。結(jié)果表明不同時(shí)期雞卵巢及各級卵泡中ERα與ERβ基因表達(dá)存在明顯的不同。這暗示兩類受體對蛋雞卵巢與卵