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1、目的:探討甘氨雙唑鈉和塞來(lái)昔布聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌 Siha和Hela細(xì)胞同步放化療的影響,為將兩藥聯(lián)合作為同步放化療增敏劑應(yīng)用于臨床上中晚期及復(fù)發(fā)宮頸癌的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:(1)用不同濃度的甘氨雙唑鈉及塞來(lái)昔布分別處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性,并繪制細(xì)胞生長(zhǎng)抑制曲線,分別求出各自的無(wú)毒濃度(在所選用的藥物濃度梯度中對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖活性的抑制作用與0μg/ml的藥物處理組相比較,差異沒(méi)有
2、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的最小濃度)和半數(shù)抑制濃度(50%inhibitory concentration, IC50);用兩藥的無(wú)毒濃度分別及同時(shí)聯(lián)合同步放化療處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性。(2)用兩藥的無(wú)毒濃度單獨(dú)處理、分別及同時(shí)聯(lián)合同步放化療處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率。(3)用兩藥的無(wú)毒濃度同時(shí)聯(lián)合同步放化療處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,倒置顯微鏡、光鏡及透射電鏡
3、觀察細(xì)胞形態(tài)的改變。
結(jié)果:(1) MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),甘氨雙唑鈉的濃度為0、25、50、100、200μg/ml,作用時(shí)間為24小時(shí)后,藥物對(duì) Siha和Hela細(xì)胞的增殖活性無(wú)抑制作用,因此取25μg/ml的甘氨雙唑鈉作為無(wú)毒濃度;塞來(lái)昔布的濃度為0、10、20、40、80μg/ml,作用時(shí)間為24小時(shí)后,0、10μg/ml的藥物濃度對(duì) Siha和Hela細(xì)胞的增殖活性無(wú)抑制作用,當(dāng)濃度為20、40、80μg/ml時(shí),塞來(lái)昔
4、布可以抑制Siha和Hela細(xì)胞的增殖,且呈劑量依賴性,因此取10μg/ml的塞來(lái)昔布作為無(wú)毒濃度,由細(xì)胞生長(zhǎng)抑制曲線可得,塞來(lái)昔布對(duì) Siha和Hela細(xì)胞的IC50分別為28.79μg/ml和27.92μg/ml;甘氨雙唑鈉(25μg/ml)和塞來(lái)昔布(10μg/ml)分別及同時(shí)聯(lián)合同步放化療(順鉑10μg/ml+放療2Gy)處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,藥物聯(lián)合組對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用比同步放化療組更顯著,且兩藥聯(lián)合組的抑制
5、作用強(qiáng)于單藥聯(lián)合組及同步放化療組。(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn),甘氨雙唑鈉(25μg/ml)和塞來(lái)昔布(10μg/ml)分別處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,藥物對(duì)細(xì)胞的凋亡無(wú)明顯促進(jìn)作用;甘氨雙唑鈉(25μg/ml)和塞來(lái)昔布(10μg/ml)分別及同時(shí)聯(lián)合同步放化療處理Siha和Hela細(xì)胞24小時(shí)后,藥物聯(lián)合組對(duì)細(xì)胞的促凋亡作用比同步放化療組更顯著,且兩藥聯(lián)合組的促凋亡作用強(qiáng)于單藥聯(lián)合組及同步放化療組。(3)甘氨雙唑鈉(25μg/
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