內(nèi)蒙古絨山羊BMP-2基因DNA序列的克隆與熒光原位雜交定位.pdf

1、本研究從內(nèi)蒙古絨山羊血中提取基因組DNA，PCR擴(kuò)增絨山羊的BMP-2基因片段，連接到pGM-T載體、轉(zhuǎn)化，篩選鑒定陽(yáng)性克隆提取質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序，和GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，對(duì)它們的核苷酸和氨基酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析，并將克隆所得質(zhì)粒標(biāo)記探針，利用FISH技術(shù)確定BMP-2在染色體上的位置。試驗(yàn)結(jié)果充實(shí)了BMP-2基因圖譜，為進(jìn)一步了解BMP-2基因信息對(duì)絨山羊的選育提供了理論支持。結(jié)果如下： 1.克隆了內(nèi)蒙古絨山羊BMP-2

2、基因的外顯子，外顯子長(zhǎng)1751bp。對(duì)絨山羊、綿羊、牛、豬、人和猴子的相應(yīng)序列做同源性比較分析和進(jìn)化樹分析，所得結(jié)果與物種間的進(jìn)化關(guān)系相符。 2.絨山羊、綿羊和牛的BMP-2基因第三外顯子的這部分序列，序列間的變異完全是堿基的替換。其中絨山羊和綿羊序列之間，發(fā)生了3個(gè)堿基替換，相似率高達(dá)99.6％，而牛與絨山羊堿基替換數(shù)目為13個(gè)，相似率為98.1％，比絨山羊與綿羊的相似率要低，比較絨山羊、綿羊和牛第三外顯子的氨基酸序列，有5處