華法林和阿司匹林吸收和分布相互作用的研究.pdf

1、華法林和阿司匹林分別是抗凝和抗血小板治療的一線藥物。臨床上很多患者既有動(dòng)脈血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，又有靜脈或心腔內(nèi)血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，單一抗凝或抗血小板藥物均只能充分抑制其中一種類型血栓形成風(fēng)險(xiǎn)，常需要華法林和阿司匹林的聯(lián)合療法。國(guó)外臨床聯(lián)用普遍，在北美有超過100萬(wàn)患者在同時(shí)接受華法林和阿司匹林的治療。但這種聯(lián)合療法的最大問題是出血風(fēng)險(xiǎn)會(huì)顯著增加。盡管兩藥聯(lián)用廣泛，但聯(lián)用證據(jù)匱乏，療效和安全性評(píng)價(jià)在國(guó)際臨床和學(xué)術(shù)界有很大爭(zhēng)議，國(guó)內(nèi)外各類臨床實(shí)踐指

2、南均未明確說明，醫(yī)生也常困惑于是否應(yīng)該以及在何種情況下對(duì)這兩種藥進(jìn)行聯(lián)用。對(duì)于兩藥聯(lián)用利弊的證據(jù)，目前國(guó)外僅有部分臨床試驗(yàn)，沒有基礎(chǔ)研究，具體的作用機(jī)制和環(huán)節(jié)尙不清楚。
　　本研究的目的在于應(yīng)用在體和體外法定量研究華法林和阿司匹林在吸收和分布環(huán)節(jié)的相互作用機(jī)制，為臨床兩藥合理聯(lián)用提供依據(jù)。本研究分為以下三部分：
　　1.華法林與阿司匹林在體腸吸收的相互作用研究
　　建立大鼠在體分腸段單向腸灌流模型，應(yīng)用重量法校正灌流液

3、體積，并采用HPLC測(cè)定灌流液中華法林對(duì)映體、阿司匹林的濃度，分別計(jì)算其吸收速率常數(shù)(Ka)和表觀吸收系數(shù)(Papp)，定量比較單用組、聯(lián)用組和誘導(dǎo)組中R-華法林、S-華法林和阿司匹林的腸吸收差異。結(jié)果顯示，與單用華法林組相比，合用阿司匹林組中R-和S-華法林的吸收無(wú)明顯變化(P＞0.05)，阿司匹林誘導(dǎo)組中R-和S-華法林在十二指腸和空腸段的吸收顯著降低(P＜0.05)；與單用阿司匹林相比，合用華法林組和華法林誘導(dǎo)組中阿司匹林在各腸段

4、的吸收均無(wú)明顯變化(P＞0.05)。提示，長(zhǎng)期使用阿司匹林對(duì)華法林對(duì)映體在十二指腸和空腸段的吸收有抑制作用，且不存在立體選擇性，而華法林對(duì)阿司匹林的吸收影響不明顯。
　　2.華法林與阿司匹林在MDCK細(xì)胞跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)相互作用研究
　　建立MDCK細(xì)胞單層跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)模型，采用MTT法篩選出華法林和阿司匹林聯(lián)用的安全濃度，定量考察華法林、阿司匹林單用和兩藥相互聯(lián)用后，R-華法林、S-華法林和阿司匹林吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的差異，采用HP

5、LC測(cè)定華法林對(duì)映體和阿司匹林的濃度，計(jì)算表觀滲透系數(shù)（Papp）。結(jié)果顯示，使用高濃度阿司匹林（200mg/L和300mg/L）能明顯降低R-和S-華法在MDCK細(xì)胞A→B的轉(zhuǎn)運(yùn)量，但僅在120min或90min變化才顯著，且能顯著降低其吸收滲透系數(shù)，同時(shí)分泌滲透系數(shù)有升高趨勢(shì)；華法林聯(lián)用阿司匹林后，阿司匹林的轉(zhuǎn)運(yùn)量和滲透系數(shù)均無(wú)明顯變化。提示，長(zhǎng)時(shí)間使用高濃度的阿司匹林能限制R-和S-華法林的吸收，無(wú)立體選擇性，可能與阿司匹林能誘導(dǎo)

6、腸道細(xì)胞MDR1的表達(dá)有關(guān)，華法林對(duì)阿司匹林的吸收無(wú)影響。
　　3.熒光光譜法研究華法林和阿司匹林與血清白蛋白的相互作用
　　在模擬生理?xiàng)l件下，利用熒光光譜法考察華法林和阿司匹林同時(shí)與人血清白蛋白的相互作用。通過 Stern-Volmer方程考察猝滅機(jī)制，計(jì)算結(jié)合常數(shù)（KA）和結(jié)合位點(diǎn)（n）。結(jié)果顯示，華法林或阿司匹林對(duì)HSA的內(nèi)源性熒光均因形成復(fù)合物而產(chǎn)生靜態(tài)猝滅，n接近1。310K時(shí)，WAR-HSA、WAR-ASA-HS

7、A體系的KA分別為3.50×104、1.20×104 L·mol-1，WAR-ASA-HSA體系與WAR-HSA的KA之比為0.34；ASA–HSA、ASA-WAR-HSA體系的KA分別為2.37×103、1.14×103 L·mol-1，ASA-WAR-HSA體系與ASA–HSA的KA之比分別為0.48。提示，華法林與阿司匹林共存時(shí)可發(fā)生相互作用，其中一種藥物的存在會(huì)使另外一種藥物與HSA的KA降低，結(jié)合穩(wěn)定性減弱，從而使得該藥物的游