豬鏈球菌不同血清型抗血清的制備及在病原流行病學調(diào)查中的應(yīng)用.pdf

1、豬鏈球菌是豬群中一種常見的條件致病菌，在世界范圍內(nèi)分布十分廣泛，革蘭氏染色陽性，血平板上呈α溶血，分為35個血清型。細菌通常定居在豬的上呼吸道(特別是扁桃體和鼻腔)、生殖道或消化道，嚴重時可引起肺炎、腦膜炎、敗血癥以及關(guān)節(jié)炎。人感染后也可出現(xiàn)腦膜炎、敗血癥、關(guān)節(jié)炎、肺炎、心內(nèi)腦炎、眼內(nèi)炎以及腹膜炎等嚴重癥狀，1968年丹麥第一次報道豬鏈球菌引發(fā)的腦膜炎病例，隨后，許多國家和地區(qū)又相繼出現(xiàn)過人感染豬鏈球菌的報道。我國每年也因豬鏈球菌遭受重

2、大的經(jīng)濟損失，甚至還出現(xiàn)過兩次嚴重的公共衛(wèi)生事件。本文對我國部分地區(qū)的豬鏈球菌流行情況進行研究，從而為我國豬鏈球菌的防治提供依據(jù)。 1.豬鏈球菌抗血清的制備和初步應(yīng)用：用豬鏈球菌35個血清型的標準菌株制備抗原，經(jīng)靜脈免疫清潔級的新西蘭白兔，免疫結(jié)束后采集血液、分離血清，對存在交叉反應(yīng)的血清進行吸附處理，經(jīng)試管凝集方法測定35個血清型抗血清的效價均高于1:32。對12株國內(nèi)豬鏈球菌分離株的凝集試驗表明：抗血清只與相同血清型的菌株存

3、在凝集反應(yīng)，可以區(qū)分出PCR方法無法鑒別的1型和14型以及2型和1/2型，并在國內(nèi)首次鑒定出豬鏈球菌13型。 2.中國部分省份豬鏈球菌的流行病學調(diào)查：2006—2007年，從重慶、浙江23個區(qū)縣共采集1418份樣品，用針對谷氨酸脫氫酶(gdh)基因的PCR方法檢測，共得到229株豬鏈球菌，其中2006年重慶的1360份樣品中檢出222株豬鏈球菌；2007年重慶的20份樣品中檢出2株豬鏈球菌，浙江的20份樣品中分離到5株豬鏈球菌。

4、二重PCR檢測結(jié)果顯示：229株豬鏈球菌中共有18株可以確定血清型，其中1/2型2株、2型7株、7型4株、9型5株。 3.中國部分省份豬鏈球菌分離株的鑒定：本試驗在PCR(針對gdh基因)鑒定的基礎(chǔ)上，用試管凝集法對重慶、杭州等地的26株豬鏈球菌分離株進行定型，并用多位點序列分型技術(shù)研究其中的23株，結(jié)果顯示：中國重慶地區(qū)流行的豬鏈球菌主要是1/2、2、7、9以及15、16等血清型，杭州主要流行豬鏈球菌2型和7型；進化樹顯示23