核桃根腐病拮抗解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵優(yōu)化及其菌劑的研制.pdf

1、核桃（Juglans regia）是胡桃科核桃屬多年生落葉果樹，核桃的果實(shí)、種殼、枝葉及木材都有多種用途，因其果仁營養(yǎng)豐富，口味較佳及其用途多樣，使核桃被評(píng)為世界四大堅(jiān)果之一。核桃在全世界很多地方都有種植，在中國核桃是經(jīng)濟(jì)樹種中分布最廣泛的樹種之一，而且在最近的研究中發(fā)現(xiàn)中國是核桃起源地之一。隨著核桃病害的逐漸嚴(yán)重，人們對(duì)于核桃病害的研究也越來越重視。通過查閱大量文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌對(duì)許多植物病害有較強(qiáng)拮抗性，因此本實(shí)驗(yàn)利用一株在預(yù)實(shí)

2、驗(yàn)中對(duì)核桃根腐病病原菌有較強(qiáng)抑制作用的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)作為生防菌，通過發(fā)酵工藝優(yōu)化提高其發(fā)酵液的抑菌率。最后，將發(fā)酵液制成一種有效的可濕性粉劑。主要內(nèi)容結(jié)果如下:
　　(1)解淀粉芽孢桿菌培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的優(yōu)化。在單因素法和正交試驗(yàn)相結(jié)合的研究中發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中最佳的碳源為1％的可溶性淀粉，最佳氮源為1％的蛋白胨，最佳無機(jī)鹽為0.01％的KH2PO4和0.05％的MgSO4;在小

3、型發(fā)酵罐中用單因素法通過不同接種量和不同時(shí)間段的抑菌率變化篩選出的最佳發(fā)酵條件為:1％的接種量和42 h的發(fā)酵時(shí)間，然后通過正交試驗(yàn)篩選出的最佳發(fā)酵條件溫度為25℃，初始pH值為7.0，攪拌速度為200 r/min，通氣量為100 L/h，在這樣的條件下可以使生防菌獲得較高的抑菌活性。其中在正交試驗(yàn)中的數(shù)據(jù)顯示營養(yǎng)元素中影響抑菌性大小的順序?yàn)?可溶性淀粉＞蛋白胨＞MgSO4＞KH2PO4;發(fā)酵條件中影響抑菌性大小的順序?yàn)?通氣量＞攪拌速

4、度＞pH＞溫度。
　　(2)可濕性粉劑的載體和助劑的篩選和最佳配比的確定。首先利用各種載體和助劑對(duì)生防菌活性的影響，采用單因素法進(jìn)行篩選，得到的結(jié)果為:載體為高嶺土，分散劑為三聚磷酸鈉，潤濕劑為十二烷基苯磺酸鈉，保護(hù)劑為腐殖酸。然后再通過懸浮率和生防菌活性兩個(gè)因素，進(jìn)行正交試驗(yàn)后得到的數(shù)據(jù)通過比較顯示最佳的配比為:高嶺土35％、三聚磷酸鈉5％、十二烷基苯磺酸鈉10％、腐殖酸2.5％，其中對(duì)于生防菌活性的影響大小的順序?yàn)?高嶺土＞三