蕓薹根腫菌Plasmodiophora brassicae拮抗菌的篩選及其種衣劑的研制.pdf

1、十字花科蔬菜根腫病是由蕓薹根腫菌(Plasmodiophora brassicae)引起的一種危害較重的世界性土傳病害。該病侵染植株根部，嚴(yán)重時引起植株根部腐爛乃至全株枯死，造成重大經(jīng)濟(jì)損失。本研究以生物防治根腫病為主要目的，采集茶樹、紅豆樹、銀杏樹和白菜的根際土和根、莖、葉、枝條等樣品帶回實(shí)驗(yàn)室分離拮抗菌，并且通過測定根腫病菌休眠孢子萌發(fā)率來篩選拮抗菌株。以兩株對根腫病休眠孢子抑制作用較好的拮抗細(xì)菌為研究材料，對這兩株拮抗細(xì)菌的發(fā)酵條

2、件進(jìn)行了研究。通過一系列的篩選試驗(yàn)，篩選出種衣劑中主要助劑的種類及用量，確定了種衣劑配方，并分別對白菜和油菜種子進(jìn)行了包衣處理，通過包衣種子的盆栽試驗(yàn)和田間試驗(yàn)對兩株細(xì)菌的抑病效果進(jìn)行了研究。試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.拮抗菌的分離、篩選和鑒定試驗(yàn)分離到細(xì)菌345株，放線菌218株，真菌139株，共分離到菌株702株，經(jīng)過篩選，得到15個菌株對根腫病休眠孢子有較好抑制作用，其中有細(xì)菌7株，分別為X203、X6、X189、X144、

3、X85、X15、X169；放線菌8株，分別為F118、F144、F187、F86、F13、F183、F36、F121。其中X203對根腫病休眠孢子的抑制作用最好，抑制率高達(dá)68.42％，X189、F36和F118的抑制效果也較好，抑制率均超過65％。經(jīng)初步鑒定X203和X189均為芽孢桿菌(Bacillus spp.)。
　　 2.生防細(xì)菌X203和X189的發(fā)酵條件對X203和X189兩株細(xì)菌進(jìn)行了發(fā)酵條件對菌體產(chǎn)生量影響的研

4、究，測定的發(fā)酵條件有培養(yǎng)基種類、碳源、氮源、溫度、pH值、初始接菌量、搖瓶裝料量和發(fā)酵時間等。結(jié)果表明，X203的最佳發(fā)酵條件是：培養(yǎng)基為NYBD培養(yǎng)基，碳源為葡萄糖，氮源為酵母浸膏，溫度為32℃，pH值為6，初始接菌量為0.5％，裝料量20mL/250mL，培養(yǎng)時間為36h。X189的最佳發(fā)酵條件是：培養(yǎng)基為YSP培養(yǎng)基，碳源為淀粉，氮源為酵母浸膏，溫度為28℃，pH值為7，初始接菌量5％，裝料量20mL/250mL，培養(yǎng)時間為48h

5、。
　　 3.生防菌劑種衣劑的研制對兩株拮抗細(xì)菌進(jìn)行了種衣劑制劑的研究，通過正交試驗(yàn)確定了主要助劑的種類和用量，正交試驗(yàn)測定的指標(biāo)是油菜種子的發(fā)芽率以及種衣劑的主要理化性狀。最終確定了助劑種類為糊精、拉開粉、羧甲基纖維素鈉，它們的用量分別為3％、1.5％、1％；通過種衣劑性狀檢測試驗(yàn)，證實(shí)了以兩種細(xì)菌為活性物質(zhì)制成的種衣劑各項(xiàng)指標(biāo)都達(dá)到了國家標(biāo)準(zhǔn)。
　　 4.生防菌劑種衣劑的防治試驗(yàn)對制成的種衣劑成品進(jìn)行盆栽防效試驗(yàn)和田

6、間防效試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明，X203和X189兩株拮抗細(xì)菌對白菜和油菜根腫病都有較好的生防作用，X203包衣處理對白菜的防效最高，盆栽試驗(yàn)防效達(dá)到62.62％，田間試驗(yàn)達(dá)到61.52％。X189的防效比X203略低，兩株拮抗菌株包衣處理對白菜和油菜品種盆栽試驗(yàn)防效均在56.52％和62.62％之間，田間防效在58.25％和61.52％之間。兩株拮抗細(xì)菌在包衣后的防效明顯高于拮抗菌培養(yǎng)液灌根，多菌靈藥劑灌根防治根腫病的防效居于拮抗菌株包衣處