發(fā)育早期半胱胺處理對肉仔雞下丘腦CRH的影響及其機(jī)制.pdf

1、本試驗(yàn)旨在探討發(fā)育早期半胱胺處理對肉仔雞下丘腦內(nèi)CRH的影響及其相關(guān)機(jī)制。試驗(yàn)通過蛋內(nèi)注射半胱胺，觀察基礎(chǔ)狀態(tài)下和LPS刺激狀態(tài)下出雛后生長仔雞下丘腦內(nèi)CRH基因和CRH免疫陽性神經(jīng)元的變化，探討發(fā)育早期半胱胺處理對快速生長期仔雞HPA軸敏感性的影響，并比較母雞飼喂半胱胺對后代胚胎及1日齡新生雛雞下丘腦CRH的影響，對半胱胺作用的相關(guān)機(jī)制進(jìn)行了初步探討。 1.蛋內(nèi)注射半胱胺對仔雞下丘腦CRH的影響及其相關(guān)機(jī)制 將羅斯30

2、8種蛋200枚隨機(jī)分為兩組，生理鹽水對照組(100μL注射用生理鹽水)和半胱胺組(小頭敲孔注射100μL含700μg CS-HCL/個蛋)，兩組種蛋在相同條件下孵化，20胚齡采樣時，稱取胚重，取下丘腦；法氏囊、脾臟、肝臟、胸淺肌、腓腸肌稱重記錄。同時，每組各灌流3只取腦用于免疫組化。出雛后稱重，子代轉(zhuǎn)入育雛室在相同條件下飼養(yǎng)。結(jié)果表明蛋內(nèi)注射半胱胺對子代20胚齡胚重、1日齡出雛重沒有影響，對其20胚齡的免疫器官指數(shù)(肝體比、脾體比和法氏

3、囊比)沒有影響，胸體比和腓體比也沒有影響.但是半胱胺組20胚齡下丘腦內(nèi)CRH和SS mRNA水平及下丘腦室旁核的CRH免疫陽性細(xì)胞數(shù)均顯著下調(diào)(P<0.05)。GR mRNA水平半胱胺組和試驗(yàn)組之間比較無顯著差異。 飼養(yǎng)第二周周末稱重后隨機(jī)分為四組(對照組和半胱胺組各自再分為兩組，即腹腔分別注射LPS組和注射生理鹽水組)，在16日齡每只雞腹腔注射500μg/Kg BWLPS，對照組注射等量生理鹽水，在18日齡和20日齡按首次劑量

4、重復(fù)注射，最后一次注射后兩小時后采樣，取其血清和下丘腦；法氏囊、脾臟、肝臟、胸淺肌、腓腸肌稱重記錄.每組各灌流3只取腦用于免疫組化.結(jié)果發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)狀態(tài)下，下丘腦內(nèi)CRH mRNA水平半胱胺組與對照組相比無顯著差異：然而，在LPS注射后，半胱胺組CRH mRNA水平顯著高于對照組(P<0.05)，這與血清中皮質(zhì)酮變化是一致的。以上結(jié)果提示：半胱胺蛋內(nèi)注射可通過程序化調(diào)控下丘腦CRH，提高生長期仔雞HPA軸應(yīng)對LPS刺激的敏感性。

5、2.母雞飼喂半胱胺對子代胚胎期及1日齡下丘腦CRH的影響 選取67周齡矮腳B種雞(三黃雞的一種)480只，平均隨機(jī)分成對照組和試驗(yàn)組，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組飼喂400 mg/Kg飼料的CT2000(主要有效成份是CS-HCL，含量30％)。采取人工授精。于五周末收集三天的蛋，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行孵化。在孵化的16胚齡、20胚齡和1日齡采樣，取下丘腦。同時，20胚齡和1日齡每組各灌流3只取腦用于免疫組化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：母雞飼喂半胱胺組對子

6、代16胚齡、20胚齡和1日齡下丘腦內(nèi)的CRH mRNA水平?jīng)]有影響；20胚齡下丘腦內(nèi)SS mRNA水平也沒有變化，對20胚齡和1日齡下丘腦內(nèi)室旁核的CRH免疫陽性神經(jīng)元的數(shù)目沒有影響.這說明對母雞的試驗(yàn)處理沒有改變子代下丘腦的CRH和SS mRNA的水平及下丘腦室旁核的CRH免疫陽性神經(jīng)元的數(shù)目。 以上試驗(yàn)表明，蛋內(nèi)注射半胱胺，顯著降低了20胚齡仔雞下丘腦CRH、SS mRNA水平及下丘腦CRH蛋白水平，并且增加了子代出雛后快速