牽張激活性離子通道對正常大鼠心室電生理和IE基因表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分:目的:心臟機(jī)械電反饋是指對心臟的機(jī)械刺激會(huì)導(dǎo)致心臟電生理特性的改變.該實(shí)驗(yàn)制備離體心臟灌流模型,觀察急性牽張左室對離體心臟電生理的作用.運(yùn)用牽張激活性離子通道阻斷劑——鏈霉素來研究牽張激活性離子通道對離體心臟電生理改變的影響,揭示牽張激活性離子通道在心臟機(jī)械電反饋中的作用.方法:該實(shí)驗(yàn)分為三組:不牽張組、牽張無鏈霉素組及牽張加鏈霉素組.離體灌流大鼠心臟的同時(shí),將一自制乳膠球囊經(jīng)左心耳置入左心室.急性膨脹球囊牽張左室,記錄并分析

2、實(shí)驗(yàn)各組心律失常的出現(xiàn)頻率和種類.結(jié)論:鏈霉素作為牽張激活性離子通道阻斷劑,能明顯減少急性膨脹心室所致心律失常的發(fā)生,提示牽張激活性離子通道在急性膨脹心室致心律失常的發(fā)生中發(fā)揮重要作用.但鏈霉素并不能完全消除心律失常,這也間接提示除牽張激活性離子通道外,牽張刺激還可能通過其他途徑致心律失常發(fā)生.第二部分:目的:胞外刺激導(dǎo)致原癌基因c-los的早期激活與表達(dá),是細(xì)胞肥大的重要始動(dòng)機(jī)制和特征性標(biāo)志.離體灌流大鼠心臟的同時(shí)持續(xù)牽張左心室,研究

3、牽張對原癌基因c-fos mRNA及蛋白水平表達(dá)的影響,揭示機(jī)械牽張致心肌細(xì)胞肥厚發(fā)生的分子機(jī)制.方法:離體灌流大鼠心臟的同時(shí),將一自制乳膠球囊經(jīng)左心耳置入左心室.膨脹球囊持續(xù)牽張左心室30分鐘后,停止灌流迅速剪下左心室,一部分用以抽提組織總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),并以β-actin為內(nèi)參照,揭示持續(xù)牽張對c-los mRNA表達(dá)水平的影響;另一部分心室行免疫組化染色,探討牽張對c-los蛋白表達(dá)的影響.結(jié)論:鏈霉素作為牽