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文檔簡介
1、約90%的傳染性疾病是病原體通過入侵機體局部黏膜引起的,黏膜成為機體抵抗病原微生物入侵的第一道防線。黏膜疫苗不僅能在接種部位誘導(dǎo)分泌特異性抗體,還能同時引起系統(tǒng)性免疫應(yīng)答,因此接種黏膜疫苗是預(yù)防和控制這類疾病的有效手段之一。沙門菌是常見的黏膜病原體,主要經(jīng)污染的食物或水感染人和動物。為預(yù)防和控制沙門菌引起的人獸共患病,對沙門菌疫苗的研究已持續(xù)了幾十年。其中,基于鼠傷寒沙門菌的疫苗研究得最多,目前已鑒定的200多種鼠傷寒沙門菌血清亞型中,
2、又以鼠傷寒沙門菌UK-1的減毒衍生物的免疫原性為佳。
常用的用于致弱細(xì)菌毒力的方法是利用基因工程方法調(diào)控其重要基因的表達(dá)或?qū)⑦@些基因直接缺失。全局調(diào)控基因就屬于沙門菌的一類非常重要的基因。以前的研究表明,將UK-1的某一全局調(diào)控基因缺失后,能使其毒力大大減弱,且保留著較強的免疫原性,能抵抗對UK-1的致死性感染。但UK-1各全局調(diào)控調(diào)控基因減毒株誘導(dǎo)系統(tǒng)性體液免疫應(yīng)答和黏膜免疫應(yīng)答的能力尚未見研究進(jìn)行綜合性的比較?;诖?,本研
3、究構(gòu)建了△crp UK-1、△envZ UK-1、△fis UK-1、△fur UK-1、△hilA UK-1、△mlc UK-1和△phoP UK-1等7株鼠傷寒沙門菌UK-1全局調(diào)控基因突變株,然后檢測經(jīng)口免疫小鼠后各突變株激發(fā)的血清IgG抗體水平以及唾液、陰道洗脫液和糞便中的分泌型IgA抗體水平,并分析比較了各突變株在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)系統(tǒng)性體液免疫應(yīng)答和局部黏膜免疫應(yīng)答的能力。結(jié)果表明,不同的全局調(diào)控基因突變株誘導(dǎo)系統(tǒng)性體液免疫應(yīng)答的
4、能力及在不同黏膜部位誘導(dǎo)局部免疫應(yīng)答的能力是不同的。在血液中,△fur、△envZ、△mlc突變株能誘導(dǎo)較高水平的OMP特異性IgG抗體;△crp、△fur、△envZ、△phoP則能誘導(dǎo)產(chǎn)生較高水平的LPS特異性IgG抗體。在口腔內(nèi),以△envZ、△fur、△phoP誘導(dǎo)分泌的OMP特異性sIgA抗體水平為高;LPS特異性sIgA抗體水平則以△crp、△fur、△phoP刺激分泌的較高。在陰道內(nèi),△crp、△fur誘導(dǎo)產(chǎn)生OMP特異性
5、sIgA的能力較強;△crp、△fur、△phoP誘導(dǎo)產(chǎn)生LPS特異性sIgA抗體的能力較強。在直腸內(nèi),△crp、△envZ、△mlc突變株誘導(dǎo)分泌OMP特異性sIgA的能力較強;△crp、△envZ、△mlc、△phoP刺激分泌LPS特異性sIgA的能力較強。盡管在不同部位誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力不同,但所有的突變株對野生型UK-1的致死性感染都提供了完全的保護作用且存活小鼠未表現(xiàn)出不健康的表觀癥狀。
總的來說,本研究為哪些基因突
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