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文檔簡介
1、目的:使用左心室注入法制造裸鼠乳腺癌骨轉(zhuǎn)移模型,確定最佳的造模細(xì)胞濃度。觀察益氣補(bǔ)腎中藥對(duì)于裸鼠乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的抑制作用,為進(jìn)一步明確作用機(jī)制做好前期準(zhǔn)備。
方法:1、將MDA-MB-231細(xì)胞株培養(yǎng)后,采用1×106、5×106、1×107個(gè)/ml三種不同濃度的細(xì)胞懸液,使用左心室注射法,制造乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的動(dòng)物模型,運(yùn)用ECT檢查及病理檢測的方法確診骨轉(zhuǎn)移,確定最佳的細(xì)胞濃度并觀察造模效果。
2、運(yùn)用左心室注射法進(jìn)行
2、裸鼠乳腺癌骨轉(zhuǎn)移造模后,將20只裸鼠隨機(jī)分成2組,治療組采用益氣補(bǔ)腎方藥灌胃,對(duì)照組采用等量的去離子水灌胃治療,共42天,每3天記錄小鼠體重,并根據(jù)體重調(diào)整藥量。42天后使用ECT檢查每只裸鼠的骨轉(zhuǎn)移情況,并進(jìn)行部分的病理檢查,采用統(tǒng)計(jì)分析,觀察益氣補(bǔ)腎方藥對(duì)于乳腺癌骨轉(zhuǎn)移模型的抑制作用。
結(jié)果:1、使用不同細(xì)胞濃度的MDA-MB-231細(xì)胞懸液進(jìn)行左心室注射法造模后,三者的造模均較為安全,無一例裸鼠死亡,但1×106、5×1
3、06個(gè)/ml細(xì)胞濃度的造模成功率低,而1×107個(gè)/ml細(xì)胞濃度造模成功率高,達(dá)75%。
2、裸鼠造模后,治療組采用益氣補(bǔ)腎的經(jīng)典方藥大補(bǔ)元煎,而對(duì)照組采用等量的去離子水進(jìn)行灌胃治療后,ECT檢查提示:治療組的骨轉(zhuǎn)移發(fā)生率為30%,相對(duì)對(duì)照組80%來說,其骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生率較對(duì)照組要低。
結(jié)論:1、使用MDA-MB-231細(xì)胞株,使用1×107/ml的細(xì)胞濃度,采用左心室注射法進(jìn)行乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的造模,是安全可靠的,陽性率
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