蘆筍抗莖枯病突變體的離體篩選及抗性生理研究.pdf

1、蘆筍(Asparagus officinalisL.)又名石刁柏，是國際上公認(rèn)的營養(yǎng)保健型高檔蔬菜，具有很高的食用和藥用價值，也是世界十大名菜之一，有“蔬菜之王”的美稱。近年來，我國已成為蘆筍第一出口大國，但是在我國蘆筍種植區(qū)，由于莖枯病的不斷發(fā)生，常導(dǎo)致蘆筍成片絕收，已嚴(yán)重影響了我國蘆筍的產(chǎn)量和質(zhì)量。蘆筍莖枯病是由天門冬擬莖點(diǎn)霉菌(Phmopsis asparagi(Sass.) Bubak)引起的一種真菌性病害。植物病原真菌在對寄主

2、的侵染過程中代謝產(chǎn)生的毒素是與病程相關(guān)的一類重要的致病因子，可以使寄主產(chǎn)生與病菌相同的毒害癥狀，目前利用毒素作為選擇壓力對植物離體組織進(jìn)行篩選得到相應(yīng)的抗性材料，已成為抗病性離體篩選中發(fā)展比較成熟且最成功的一個體系。本試驗(yàn)研究了蘆筍莖段誘導(dǎo)愈傷組織的適宜條件，蘆筍莖枯病病原菌適宜的產(chǎn)毒培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，以及毒素對蘆筍愈傷組織抗性的誘導(dǎo)和毒素處理對蘆筍愈傷組織內(nèi)防御酶活性的影響，并將抗性愈傷組織誘導(dǎo)成苗后，對其進(jìn)行抗病性鑒定，建立了蘆筍抗

3、莖枯病突變體的離體篩選體系。主要研究結(jié)果如下:
　　1.‘阿波羅’、‘冠軍’和‘NJ987'3個蘆筍品種莖段誘導(dǎo)愈傷組織的最適條件為MS+1.5mg/L6-BA+1.5～2.0mg/L NAA。
　　2.通過病菌的常規(guī)分離法和梯度稀釋法相結(jié)合，從田間病株上分離出具有蘆筍莖枯病菌典型特征的病菌，經(jīng)分子生物學(xué)鑒定，為蘆筍莖枯病菌Phmopsisaspa ragi;并篩選出其最適的產(chǎn)毒培養(yǎng)條件:在pH為7的Fries培養(yǎng)基中27℃

4、黑暗條件下120rpm連續(xù)振蕩培養(yǎng)12d，此條件下產(chǎn)生的毒素對胚根的抑制率可達(dá)97.69％;通過針刺接種法，將病菌產(chǎn)生的毒素提取液接種到田間的蘆筍幼莖上，使幼莖呈現(xiàn)出蘆筍莖枯病田間發(fā)病的典型癥狀，證明了蘆筍莖枯病菌毒素具有致病力。
　　3.3個品種愈傷組織抗性誘導(dǎo)的適宜毒素濃度為毒素液的30％～40％;經(jīng)過毒素處理后存活的愈傷組織對莖枯病菌毒素的抗性增強(qiáng)。
　　4.毒素處理后3個品種愈傷組織的SOD、POD、CAT、PAL和