應用激光捕獲顯微切割技術進行人和大鼠不同階段生精細胞差異表達基因的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、我們利用激光捕獲顯微切割(Laser Capture Microdissection ,LCM)技術,成功地捕獲和分離了人和大鼠的初級精母細胞的圓形精子細胞.在此基礎上從分離的兩種細胞中提取RNA,合成雙鏈cDNA,并進一步通過抑制性消減雜交(Suppressive Subtractive Hybridization,SSH)方法構建了人圓形精子細胞消減初級精母細胞cDNA文庫、大鼠初級精母細胞(RSA)和圓形精子細胞(RSB)的雙向c

2、DNA消減文庫.基中所構建人圓形精子細胞消減初級精母細胞cDNA文庫的滴度高達5.6×10<'7>/ml,重組質?？寺￡栃月蕿?8.89,插入片段大小分布主要集中于500bp~750bp.所構建文庫的滴度高達8.3×10<'9>/ml,重組質?？寺￡栃月蕿?1.67﹪,插入片段大小分布于250bp~1.7kp,主要集中于500bp~1kp.大鼠初級精母細胞(RSA)和圓形精子細胞(RSB)的雙向cDNA消減文庫的滴度達8.3×10<'7

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