甘藍(lán)型油菜人工合成種的創(chuàng)建及細(xì)胞學(xué)與分子標(biāo)記分析.pdf

1、甘藍(lán)型油菜(Brassicanapus,2n=AACC=38)是甘藍(lán)(B.oleracea,2n=CC=18)與白菜(B.campestris,2n=AA=20)天然雜交進(jìn)化形成的復(fù)合種。利用現(xiàn)有豐富的甘藍(lán)和白菜資源人工合成甘藍(lán)型油菜是拓寬甘藍(lán)型油菜遺傳基礎(chǔ)的重要途徑之一。重慶市油菜工程技術(shù)研究中心首次在羽衣甘藍(lán)(B.oleraceavar.acephala)中發(fā)現(xiàn)了C染色體組黃籽基因資源,其對于黃籽甘藍(lán)型油菜的培育有重要價值,借助胚挽

2、救技術(shù)獲得了黃籽白菜型油菜×黃籽羽衣甘藍(lán)人工合成甘藍(lán)型油菜。該人工合成甘藍(lán)型油菜S0～S2代結(jié)黑籽,自交S3代中出現(xiàn)黃籽和黑籽植株的分離,并且粒色遺傳表現(xiàn)不穩(wěn)定性,分離出的黃籽系后代中還會分離出黑籽植株。為了進(jìn)一步豐富甘藍(lán)型油菜育種資源,了解人工合成甘藍(lán)型油菜粒色性狀分離和不穩(wěn)定的因為,本試驗開展了黃籽羽農(nóng)甘藍(lán)×黃籽白菜型油菜以及(芥藍(lán)×黃籽羽衣甘藍(lán))×黃籽白菜型油菜人工合成甘藍(lán)型油菜研究,關(guān)于多變種復(fù)合雜交人工合成甘藍(lán)型油菜的報道還不

3、多見；對(芥藍(lán)×黃籽羽農(nóng)甘藍(lán))×黃籽白菜型油菜人工合成甘藍(lán)型油菜單倍體和雙二倍體減數(shù)分裂染色體行為進(jìn)行了觀察；對黃籽白菜型油菜×黃籽羽衣甘藍(lán)人工合成甘藍(lán)型油菜自交S6代黃籽和黑籽株系減數(shù)分裂染色體行為進(jìn)行了觀察,并對S6代黃籽和黑籽株系進(jìn)行了SSR分子標(biāo)記多態(tài)性分析和比較。主要結(jié)果如下:
　　 1.羽衣甘藍(lán)×白菜型油菜2變種間雜交以及(芥藍(lán)×羽衣甘藍(lán))×白菜型油菜3變種間雜交均存在不親和性,父本基因型對種間雜交不親和性大小有重要

4、作用；其雜交不親和性既表現(xiàn)有受精前不親和性障礙,也有受精后不親和性障礙,但主要表現(xiàn)為受精后雜種胚敗育。
　　 2.通過胚珠培養(yǎng)得到1個(芥藍(lán)×黃籽羽衣甘藍(lán))×黃籽白菜型油菜人工合成甘藍(lán)型油菜和3個黃籽羽農(nóng)甘藍(lán)×黃籽白菜型油菜人工合成甘藍(lán)型油菜,為進(jìn)一步研究和甘藍(lán)型油菜育種提供了新的材料。
　　 3.人工合成甘藍(lán)型油菜在形態(tài)上綜合了親本的特征。(芥藍(lán)×羽衣甘藍(lán))×白菜型油菜人工合成甘監(jiān)型油菜自交高度不親和,其與天然甘藍(lán)型油

5、菜間的雜交親和性較高,親和性大小與父本基因型有關(guān)。
　　 4.對人工合成甘藍(lán)型油菜單倍體染色體加倍試驗表明,含200mg/L秋水仙堿MS液體培養(yǎng)基浸根處理人工合成甘藍(lán)型油菜試管苗1d是最優(yōu)的染色體加倍條件。
　　 5.(芥藍(lán)×黃籽羽衣甘藍(lán))×黃籽白菜型油菜人工合成甘藍(lán)型油菜單倍體PMCs中參與聯(lián)會的染色體數(shù)目多,有12～19條染色體參與了聯(lián)會；其雙倍體在減數(shù)分裂的終變期、中期Ⅰ和后期Ⅰ均存在一定程度的染色體行為異常,雙倍

6、體平均染色體配對構(gòu)型為0.01Ⅵ+0.79Ⅳ+0.46Ⅲ+16.60Ⅱ+0.19Ⅰ,說明即使在染色體加倍情況下,仍然發(fā)生了同源異源染色體聯(lián)會,人工合成甘監(jiān)型油菜雙二倍體具有細(xì)胞學(xué)不穩(wěn)定性。
　　 6.黃籽白菜型油菜×黃籽羽衣甘藍(lán)人工合成甘藍(lán)型油菜自交S6代黃籽材料終變期平均染色體配對構(gòu)型為0.03Ⅵ+0.01Ⅴ+0.83Ⅳ+0.08Ⅲ+17.08Ⅱ+0.05Ⅰ,黑籽材料終變期平均染色體配對構(gòu)型為0.03Ⅵ+0.87Ⅳ+0.04Ⅲ

7、+17.08Ⅱ+0.02Ⅰ,說明人工合成甘監(jiān)型油菜自交S6代黃籽材料和黑籽材料均發(fā)生了同源異源染色體聯(lián)會,具有細(xì)胞學(xué)不穩(wěn)定性；其黃籽材料和黑耔材料都存在較大頻率的染色體行為異常,但黃籽和黑籽材料間染色體行為差異不顯著。
　　 7.76對SSR引物在人工合成甘藍(lán)型油菜自交S6代擴(kuò)增共得到240個多態(tài)性片段,平均每條引物產(chǎn)生3.16個多態(tài)性,說明在人工合成甘藍(lán)型油菜自交S6代群體中存在較大的遺傳變異。對人工合成甘藍(lán)型油菜S6代黃籽和