人工合成甘藍(lán)型油菜白花性狀的遺傳研究.pdf

1、本文以普通黃花甘藍(lán)型油菜中油.821、HZ21-1與人工合成甘藍(lán)型油菜白花品系HW243為親本材料雜交，配制成中油821×HW243、HZ21-1×HW243兩個(gè)雜交組合的各六個(gè)世代，即：P<,1>、P<,2>、F<,1>、RF<,1>、F<,2>、B<,1>、B<,2>，分別在四川雅安和四川康定(海拔高度為2650m)兩地種植這些世代群體，以花瓣目測法、花瓣色素提取法和花瓣掃描法對花色進(jìn)行了鑒定，分析了白花性狀的遺傳規(guī)律。同時(shí)利用BS

2、A法(集群混合法)對雜交組合“中油821×HW243"白花性狀相連鎖的SSR分子標(biāo)記進(jìn)行了鑒定。主要研究結(jié)果如下： 1.田間目測法對油菜花瓣顏色觀察的結(jié)果表明，黃花親本(P<,1>)與白花親本(P<,2>)雜交，正反交雜種F<,1>花色均表現(xiàn)為雙親中間花色，即乳白色，但略偏向于白花親本。F<,2>代中花色可大致分為三種顏色，即白花：乳白花：黃花，分離比例為1：11：4；B<,1>群體可分為兩種花色：乳花和黃花，分離比例為1：1；

3、B<,2>群體中可分為白花和乳白花，分離比例為1：3。 2.使用蒸餾水、無水乙醇、丙酮、石油醚、乙醚、甲醇和三氯甲烷七種溶劑對油菜花瓣色素進(jìn)行了提取，以無水乙醇提取的效果最佳，確定無水乙醇作為本實(shí)驗(yàn)的提取溶劑。無水乙醇色素提取液受酸堿度(pH)、溫度影響差異不顯著。利用紫外可見分光光度計(jì)對花瓣色素提取液進(jìn)行了檢測，以439nm和469nm波長的吸光度值在兩親本(P<,1>、P<,2>和雜種F<,1>之間差異最明顯。本實(shí)驗(yàn)采用43

4、9nm波長光譜對雜種后代的花瓣色素提取液進(jìn)行了系統(tǒng)分析。結(jié)果表明，正反交F<,1>間吸光度值高度一致，差異不顯著，而分離群體內(nèi)單株之間吸光度值差異極顯著。將吸光度值劃分成0～0.1(白花親本附近)、0.1～0.5(正反交F<,1>附近)和0.5～2(黃花親本附近)三個(gè)區(qū)間，將分離群體按吸光度值進(jìn)行頻次統(tǒng)計(jì)，經(jīng)X<'2>測驗(yàn)，在F<,2>群體中分離比例白花(吸光度值0-0.1)：乳白花(吸光度值0.1-0.5)：黃花(吸光度值0.5-2)

5、為1：11：4，B<,1>群體中分離比例乳白花(吸光度值0.1-0.5)：黃花(吸光度值0.5-2)為1：1，B<,2>群體中分離比例白花(吸光度值0-0.1)：乳白花(吸光度值0.1-0.5)為1：3。這些分離比率與目測法結(jié)果一致。 3. 對花瓣用掃描儀掃描，掃描圖片的顏色特征值分析表明，顏色提取軟件提取到CIE RGB中的B值和CIE Lab中的b值能夠用來對花色變化進(jìn)行分析，本實(shí)驗(yàn)采用CIERGB中的B值對雜種后代的花色進(jìn)

6、行系統(tǒng)分析。結(jié)果表明，正反交F<,1>之間B值高度一致，差異不顯著，而分離群體內(nèi)單株之間B值差異極顯著。將B值劃分成0～100(黃花親本附近)、100～195(正反交F<,1>附近)和195～255(白花親本附近)三個(gè)區(qū)間，將分離群體按B值進(jìn)行頻次統(tǒng)計(jì)，經(jīng)x<'2>測驗(yàn)，在F<,2>群體中分離比例白花(B值195-255)：乳白花(B值100-195)：黃花(B值0-100)為1：11：4，B<,1>群體中分離比例乳白花(B值100-1

7、95)：黃花(B值0-100)為1：1，B<,2>群體中分離比例白花(B值195-255)：乳白花(B值100-195)為1：3。這些分離比率與目測法和色素提取法結(jié)果一致。 4.根據(jù)目測法、色素提取法和掃描法對花瓣顏色遺傳分析結(jié)果，可以推斷，白花性狀受兩對不完全顯性核基因互作控制。白花親本基因型為W<,1>W<,1>W<,2>W<,2>，黃花親本的基因型為W<,1>W<,1>W<,2>W<,2>，雜種F<,1>的基因型則為’Wl

8、wlW2w2，其花色為乳白花。在雜種后代中，當(dāng)兩對花色基因均為顯性純合時(shí)，即W<,1>W<,1>W<,2>W<,2>，表現(xiàn)為純白花：當(dāng)W<,1>位點(diǎn)為隱性純合基因型(W<,1>W<,1>)時(shí)，對W<,2>位點(diǎn)顯性白花基因?qū)a(chǎn)生隱性上位作用，于是，凡具有純合W<,1>W<,1>基因型的個(gè)體，都是黃色花瓣；其余的基因型均為乳白花。 5.用600對SSR引物對雜交組合“中油821xHW243”進(jìn)行多態(tài)性篩選， 90對引物在兩親本間表現(xiàn)

9、出多態(tài)性，多態(tài)性頻率為15％；6對引物在F<,2>群體黃花和白花兩個(gè)近等基因池間表現(xiàn)出多態(tài)性。將這6對引物對F<,2>群體中黃花和白花單株DNA進(jìn)行擴(kuò)增顯示，引物B36(Na12-G03)與白花性狀存在明顯的連鎖關(guān)系。 6.甘藍(lán)型油菜白花性狀是一個(gè)遺傳行為較復(fù)雜的性狀。在本試驗(yàn)中，雜種分離群體內(nèi)的乳白花單株間表現(xiàn)出一定程度的白色差異，似乎與白花主效基因的數(shù)目有關(guān)，同時(shí)也可能存在微效背景基因的修飾作用，有待進(jìn)一步研究。 7