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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)酵木糖產(chǎn)酒精酵母誘變育種研究姓名:牟建樓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程指導(dǎo)教師:王頡;張偉20050617S t u d y o nB r e e d i n g o f X y l o s e F e r m e n t a t i o n Y e a s t t oP r o d u c e E t h a n o lC o l l e g e o f F o o d S c i e n c
2、e &T e c h n o l o g y , A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t yo f H e b e iA u t h o r :M u J i a n —I o uP r o f e s s i o n :F o o d P r o c e s s a n d S t o r a g e E n g i n e e r i n gT u t o r :W a n g J i eP
3、 r o f e s s o r a n d Z h a n g W e i P r o f e s s o rA b s t r a c tA s n o n r e n e w a b l e f o s s i l r u e l r e s e r v e s d w i n d l e a n d i t s p r i c e i S c l i m b i n g u pc o n t i n u o u s l y ,
4、t h e i d e a o fp r o d u c t i o n o fe t h a n o l f r o mr e n e w a b l e p l a n t b i o m a s s i Si n c r e a s i n g l ym o r e a t t r a c t i v e 。D - x y t O S ec o m p r i s e n e a r l yo n e - t h i r do f
5、 t h er e d u c i n gs u g a r so f i i g n o c e t l u l o s i c sh y d r o l y s a t e 。t h ee c o n o m i c e x p l o i t a t i o no f l i g n o c e l l u l o s i c sf o re t h a n 0 1p r o d u c t i o nw i l l t h u
6、ss i g n i f i c a n t l yb ee n h a n c e db yt h ee f f i c i e n tu t i l i z a t i o no f D - x y l o s e .S o m ey e a s t s a r e a b l e t o f e r m e n t x y l o s e 。b u t e t h a n o l c o n c e n t r a t i o n
7、 a n d y i e l d a r ec o r r e s p o n d i n g l y l o w .I na n a t t e m p t t oe x t e n d a n d i m p r o v e t h e p o s s i b i l i t i e sf o rf e r m e n t i n gx y l o s ew i t h y e a s 括.P 耙壽i as t i p i t i
8、sw a s t a k e n 裙s t a r t i n gs t r a i n .玨b e t t e rs t r a i nM ·lv c a ss c r e e n e d b y U V a n d t h e o p t i m a l f e r m e n t a t i o n c o n d i t i o n s w e r e s t u d i e d .E 艉c t o ft h e c
9、u l t u r e a g e , t h e e n z y m e c o n c e n t r a t i o n ,t e m p e r a t u r e ,e n z y m a t i ch y d r o l y s i st i m ea n do s m o t a n t s0 1 1 氆ef o r m a t i o na n dr e g e n e r a t i o no f p r o t o
10、p l a s tf r o mP i c h i as t i p i t i s w e r es t u d i e d , t h r e e —f a c t o ra n dt h r e e - l e v e lo r t h o g o n a le x p e r i m e n t sw e r ed e s i g n e dt o s t u d yt h es i n g l e f a c t o ri n
11、 c l u d i n ge n z y m e sc o n c e n t r a t i o n ,t e m p e r a t u r ea n de n z y m a t i c h y d r o l y s i s t i m e 。t h e o p t i m u m c o n d i t i o n s f o r P i c h i a s t 螄i t i s p r o t o p l a s tg e
12、 n e r a t i o na n dr e g e n e r a t i o nw e r ed e t e r m i n e d :h y p h aa g ew a s5 h ,e n z y m ec o n c e n t r a t i o nw a sl 。5 %。e n z y m a t i ch y d r o l y s i st i m eW a Sl 。5 h ,e n z y m a t i ct e
13、 m p e r a t u r ew a s2 8 ℃a n ds o r b i t o lW a S s e l e c t e da s o s m o t a n t s ,u n d e r t h eo p t i m u m c o n d R i o n , t h e g e n e r a t i o n q u o t i e t ya n d r e g e n e r a t i o n q u o t i
14、e t yw e r e 8 4 %a n d 4 .5 %r e s p e c t i v e l y .T h e r e l a t i o no f l e t h a l i t yo f P i c h i a s t 加i t i sp r o t o p l a s ta n d U V l i g h ti r r a d i a t e dd o s eW a sa l s oe x a m i n e d i n
15、t h i ss t u d y , t h e r e s u l t ss u g g e s t e d t h a tw h e n U V l i g h ti r r a d i a t e dd o s eW a s2 0w a t Ld i s t a n c e w a s3 0 c ma n di r r a d i a t e d t i m ew a s 1 2 0s e c o n d s ,t h e l e
16、 t h a l i t y o fp r o t o p l a s t w a s 7 2 %.T h e r e g e n e r a t e d p r o t o p l a s t w a sp r i m a r i l y s c r e e n e d u n d e rt h ec o n d i t i o n a b o v e .A s t r a i nM —1w a s a c h i e v e d a
17、 f t e rt w o t u r n so f s c r e e n e d , t h ea l c o h o lc o n c e n t r a t i o no ft h i s s t r a i n w a s6 .靜蛆a f t e r4 8 h o u r sf e r m e n t a t i o n , w h i c hW a si n c r e a s e d 秘‘| 9 %c o m p a r
18、e d w i t h o r i g i n a ls t r a i n4 .4 7 9 /L .t h er e s i d u e o f s u g a r o f M - la n d p a r e n t s t r a i nw e r e0 ,4 5 9 /L .O .6 1 e ;/Lr e s p e c t i v e l y , T h ee f f e c to fs e r i a lp a s s a
19、g eo nt h eg e n e t i cs t a b i l i t yw a s .s t u d i e da n d t h e r e s u l t sd e m o n s t r a t e d t h a tc o m p a r e d w i t ho r i g i n a ls t r a i n ,t h ef e r m e n t a t i o na b i l i t vo f 鹺一lf r
20、o ml “l(fā) 。2 ∥’p a s s a g e d i d n o t v a r y s i g n i f i c a n t l y .I na d d i t i o n 。t h eg r o w t ha n df e r m e n tc h a r a c t e r i s t i c so f M —1 w e r ee x a m i n e di nt h i sp a p e r , i n c l u
21、d i n gg r o w t ht e m p e r a t u r e ,p H ,f e r m e n t a t i o nt e m p e r a t u r e ,p H ,a n d r o t a t i n gr a t ef o r M —l a n ds t u d i e dt h e i r a f f e c t i o n o ng r o w t ha n df e r m e n t a t i
22、 o nc u r v e .T h eo p t i m a lc o n d i t i o n s f o r M - l g r o w t h w a s2 8 ℃,5 .0 ( p } { ) ,T h e o p t i m a l c o n d i t i o n s f o r M .1f e r m e n t a t i o n w a s 2 8 ℃。5 .0 ( p H ) 。a n dr o t a t i
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