阿魏酸鈉對(duì)順鉑誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、順鉑是臨床上最常用的化學(xué)藥物之一，廣泛應(yīng)用于各種實(shí)體瘤的治療，順鉑劑量依賴性的腎毒性限制其臨床治療腫瘤的效果。順鉑誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞的凋亡在順鉑腎毒性中發(fā)揮著重要的作用。利用順鉑誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生凋亡，研究中藥阿魏酸鈉對(duì)腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響，探討阿魏酸鈉對(duì)順鉑引起的腎毒性的保護(hù)機(jī)制，為臨床順鉑腎毒性的治療提供理論基礎(chǔ)。 方法：體外培養(yǎng)的正常大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)分為空白、順鉑誘導(dǎo)、不同劑量的阿魏酸鈉保護(hù)組，

2、每組設(shè)三復(fù)孔。選擇50uM順鉑作用24小時(shí)作為模型，給予不同濃度的阿魏酸鈉保護(hù)，觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)，流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，TUNEL驗(yàn)證細(xì)胞凋亡，免疫組化和RT-PCR檢測(cè)bax，bcl-2蛋白和mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：(1)與對(duì)照組相比，50uM順鉑誘導(dǎo)了腎小管上皮細(xì)胞凋亡，DAPI染色出現(xiàn)核固縮、核碎裂，流式AnnexinV-PI凋亡率增加，TUNEL證實(shí)細(xì)胞凋亡(P<0.05)。免疫組化和RT-PCR觀察bax蛋白和mRNA表

3、達(dá)上調(diào)，bcl-2蛋白和mRNA表達(dá)變化不顯著(P<0.05)；(2)與對(duì)照組和50uM順鉑誘導(dǎo)組相比，從形態(tài)學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)觀察到不同濃度的阿魏酸鈉保護(hù)組明顯抑制了順鉑誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡；免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)bax蛋白表達(dá)下調(diào)，bc1-2蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05)，RT-PCR．檢測(cè)到baxmRNA下調(diào)，bc1-2 mRNA上調(diào)(P<0.05)。 結(jié)論：1．順鉑時(shí)間劑量依賴性誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞凋亡；2．不同濃度的阿魏酸鈉對(duì)細(xì)