白藜蘆醇對順鉑誘導(dǎo)腎小管上皮細胞凋亡的干預(yù)研究.pdf

1、目的：
　　觀察白藜蘆醇對順鉑誘導(dǎo)腎小管上皮細胞凋亡的干預(yù)作用。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)腎小管上皮細胞系 HK-2。實驗分為正常對照組、順鉑組和不同濃度白藜蘆醇干預(yù)組。用乳酸脫氫酶釋放實驗檢測不同濃度順鉑（0μg/mL、3.125μg/mL、6.25μg/mL、12.5μg/mL、15μg/mL）對HK-2細胞的毒性作用，同時檢測12.5μg/mL順鉑聯(lián)合不同濃度白藜蘆醇（0mmol/L、0.01mmol/L、0.1

2、mmol/L、0.5mmol/L）對HK-2細胞的最大作用濃度。觀察順鉑（12.5μg/mL）或順鉑和不同濃度白藜蘆醇（0.01mmol/L、0.05mmol/L、0.1mmol/L）處理前后N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（N-Acetyl-D-Glucosaminidase，NAG）的改變情況；MTT法觀察細胞的生長增殖情況；用 Hoechst染色法觀察細胞的形態(tài)學(xué)改變，Annexin V-FITC/PI流式細胞術(shù)分析HK-2細胞凋

3、亡的情況。
　　結(jié)果：
　　1.乳酸脫氫酶釋放實驗顯示，0～12.5μg/mL順鉑對HK-2細胞LDH（Lactate dehydrogenase，乳酸脫氫酶）漏出率無明顯影響（P>0.05）。12.5μg/mL順鉑聯(lián)合不同濃度白藜蘆醇共孵育HK-2細胞24h，0～0.1mmol/L白藜蘆醇對HK-2細胞的LDH漏出率無明顯影響（P>0.05），聯(lián)合0.5mmol/L白藜蘆醇對HK-2細胞的LDH漏出率顯著升高（P<0.05

4、）。
　　2. MTT結(jié)果顯示，12.5μg/mL順鉑對HK-2細胞的吸光度值有明顯抑制作用，較正常對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。經(jīng)不同濃度白藜蘆醇處理后， HK-2細胞的吸光度值隨著白藜蘆醇濃度的增加而上升（P<0.05）。
　　3.12.5μg/mL順鉑作用于HK-2細胞后，NAG濃度顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而白藜蘆醇處理能顯著降低順鉑誘導(dǎo) HK-2細胞釋放NAG（P<0.05）。

5、r>　　4. Hoechst染色結(jié)果顯示，順鉑處理的HK-2細胞，出現(xiàn)明顯的凋亡小體，說明其能引起HK-2細胞的凋亡。而白藜蘆醇能在一定程度上抑制HK-2細胞的凋亡（P<0.01）。
　　5. Annexin V-FITC/PI流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，與對照組相比，順鉑能明顯誘導(dǎo) HK-2細胞凋亡（P<0.01）。白藜蘆醇處理后，凋亡率顯著下降（P<0.01），并呈一定的劑量依賴性（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　白