維甲酸與砷劑體內(nèi)外對APL細(xì)胞增殖分化調(diào)控的比較性研究.pdf

1、目的：隨著ATRA或As2O3臨床誘導(dǎo)分化治療病例的不斷擴(kuò)大，逐漸發(fā)現(xiàn)該兩種藥物體內(nèi)均可以引起白細(xì)胞明顯升高。本研究主要對維甲酸和As2O3進(jìn)行了體內(nèi)和體外比較性研究，預(yù)期進(jìn)一步揭示上述現(xiàn)象的分子機(jī)制。方法：ELISA法測定血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-8、G-CSF、sICAM-1和sVCAM-1水平變化，流式細(xì)胞儀測定APL細(xì)胞表面粘附分子sICAM1，CD11b和CD106表達(dá)水平，Westernblot測定

2、STAT1和STAT3蛋白表達(dá)水平，半固體瓊脂法測定APL患者L-CFU和GM-CFU集落數(shù)。結(jié)果：1、維甲酸一般在7～10天內(nèi)誘導(dǎo)明顯的外周血白細(xì)胞升高，平均第12天達(dá)到高峰。2、三氧化二砷除了誘導(dǎo)APL平均第15天達(dá)到高峰外，其它變化與ATRA相似。3、在細(xì)胞因子與細(xì)胞增殖方面，證實(shí)血清IL-1、IL-6、IL-8、G-CSF等發(fā)生變化，血清G-CSF與外周血的白細(xì)胞數(shù)量變化呈相關(guān)性，但是此因素不是決定細(xì)胞變化的唯一因素。4、體外1

3、0-6mol/L或體內(nèi)以10mg/天靜脈滴注三氧化二砷治療96h后，APL細(xì)胞分泌IL-1β和G-CSF平均水平升高，IL-6和IL-8水平降低，TNFα水平無明顯變化。體外APL細(xì)胞的增殖比率與IL-1β或G-CSF分泌升高比率呈現(xiàn)正相關(guān)。5、APL患者的血清sICAM-1和sVCAM-1水平明顯升高。APL細(xì)胞表面粘附分子sICAM1，CD11b和CD106表達(dá)增加。6、無論IL-1β抑或是G-CSF升高患者，原代APL細(xì)胞STAT

4、1蛋白表達(dá)均增加，而只有G-CSF升高者STAT3蛋白表達(dá)升高。證實(shí)內(nèi)原性G-CSF明顯促進(jìn)STAT3表達(dá)，并經(jīng)過STAT3發(fā)揮其增殖分化調(diào)控作用。9、ATRA或As2O3治療后，骨髓L-CFU則隨著誘導(dǎo)分化治療呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。而GM-CFU在白細(xì)胞升高期時(shí)增加不明顯，完全緩解后明顯升高。但是，與患者血清共同培養(yǎng)后，高峰期血清明顯促進(jìn)L-CFU生成作用。結(jié)論：IL-1β或G-CSF分泌增加與ATRA或三氧化二砷誘導(dǎo)后的APL細(xì)胞升高有