草烏提取物的透皮吸收機(jī)理研究.pdf

1、經(jīng)皮給藥系統(tǒng)(TransdermDeliverySystem，TDS)又稱經(jīng)皮治療系統(tǒng)(TransdermalTherapeuticSystem，TTS)，它是指藥物以一定速率通過皮膚經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入體循環(huán)產(chǎn)生藥效的一類制劑。藥物經(jīng)皮吸收主要是通過角質(zhì)層和活性表皮浸潤真皮，經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入體循環(huán)。皮膚對大多數(shù)藥物而言是經(jīng)皮給藥的屏障，許多藥物透皮給藥后，滲透速率達(dá)不到治療要求，所以尋找促進(jìn)藥物透皮吸收的方法是開發(fā)透皮給藥系統(tǒng)的關(guān)鍵。它包

2、括物理方法、化學(xué)方法和藥劑學(xué)方法。滲透促進(jìn)劑(penetrationenhancers)能夠增加藥物透皮速度或增加藥物透皮量，是研究最多的一種促進(jìn)藥物透皮吸收的化學(xué)方法。 離子導(dǎo)入(iontophoresis，IP)是通過在皮膚上應(yīng)用適當(dāng)?shù)闹绷麟姸黾铀幬锓肿油高^皮膚進(jìn)入機(jī)體的過程。陽離子藥物在陽極處透過皮膚，陰離子藥物在陰極處透過皮膚，中性分子在電滲流作用下也能透過皮膚。運(yùn)用離子導(dǎo)入法，可有效地促進(jìn)一些藥物，特別是離子型藥物及

3、多肽類大分子的透皮吸收，并且由于電場的作用，增強(qiáng)了水通過皮膚的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而也增加非電解質(zhì)藥物的皮膚滲透。 由于皮膚角質(zhì)層由富含脂質(zhì)的角質(zhì)細(xì)胞組成，含水量僅約20％，是電的不良導(dǎo)體。當(dāng)電流通過時，角質(zhì)層產(chǎn)生阻抗，在連續(xù)使用直流電流時，出現(xiàn)電荷貯存，形成極化電流，這種極化電流與直流電流方向相反，明顯排斥藥物離子向反向電極的移動，降低離子導(dǎo)入效率。改用脈沖電流，選擇適當(dāng)?shù)牟ㄐ巍㈩l率和占/空比，可能消除皮膚極化現(xiàn)象。 草烏(蒙藥名

4、：泵阿)為毛茛科植物北烏頭AconitumKusnezoffiiReichb.的干燥塊根，屬蒙醫(yī)臨床和中醫(yī)臨床中使用頻率比較多見的一味藥，主要含有二萜類生物堿，如烏頭堿(Aconi2tine)、次烏頭堿(Hypaconitine)、新烏頭堿(Mesaconitine)等。 草烏、川烏是蒙醫(yī)和中醫(yī)治療風(fēng)濕痹痛之要藥，是治療風(fēng)濕類疾病口服制劑和外用制劑中常用的藥物。現(xiàn)代藥理研究證明：草烏具有鎮(zhèn)痛、抗炎、局部麻醉、抗腫瘤等作用，其中烏

5、頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿既是其有效成分，也是其毒性成分，經(jīng)過炮制后可水解成毒性較小的生物堿，因此生品有毒，多外用于腫毒及止痛，制后毒性降低，可供內(nèi)服，但其藥效成分含量也相應(yīng)降低。 本研究旨在通過觀察不同促透方法對草烏提取物透皮吸收速率的影響，以及在不同促透方法下外用草烏提取物對動物生理指標(biāo)的影響，尋找促進(jìn)藥物透皮吸收的最佳條件和方法，以期開發(fā)出安全、有效的新劑型。 本研究分為五個部分：生草烏有效成分的提取、草烏提取物中新

6、烏頭堿的含量測定、草烏提取物中新烏頭堿透皮速率測定、草烏提取物外用對大鼠足跖腫脹的影響和動物皮膚組織形態(tài)學(xué)的觀察。 首先采用水煎、大孔樹脂分離提取法對生草烏進(jìn)行成分提取，并采用HPLC法測定草烏提取物中有效成分新烏頭堿的含量，計算得出草烏提取物中新烏頭堿含量為3.94701±0.12499mg/g，并由此推算1g草烏生藥中新烏頭堿含量為0.29085mg。在第三部分中我們采用Franz擴(kuò)散池法收集草烏提取物透皮接受液，用HPLC

7、法測定草烏提取物中新烏頭堿的離體透皮速率。結(jié)果顯示：在未使用任何促透方法的條件下，草烏提取物中的新烏頭堿透皮速率為3.6929μg/cm2·h；在加入透皮促進(jìn)劑氮酮(Azone)和丙二醇各為4％的條件下，草烏提取物中的新烏頭堿透皮速率為32.143μg/cm2·h；在使用低頻電磁復(fù)合脈沖刺激的條件下，草烏提取物中的新烏頭堿透皮速率為25.754μg/cm2·h；在促透劑與低頻電磁復(fù)合脈沖刺激聯(lián)合應(yīng)用的條件下，草烏提取物中的新烏頭堿透皮速

8、率為58.517μg/cm2·h。從新烏頭堿的透皮速率數(shù)據(jù)分析，可以認(rèn)為其釋放量與時間成線性關(guān)系。對比單純給予藥物、使用促透劑、低頻電磁復(fù)合脈沖刺激和促透劑與低頻電磁復(fù)合脈沖刺激聯(lián)合應(yīng)用對草烏提取物透皮吸收的影響，結(jié)果表明：低頻電磁復(fù)合脈沖刺激可提高草烏提取物經(jīng)皮吸收的累計滲透量和透皮擴(kuò)散速率，與單純給藥組相比，第24小時有顯著差異。促透劑與低頻電磁復(fù)合脈沖刺激聯(lián)合應(yīng)用可明顯提高草烏提取物經(jīng)皮吸收的累計滲透量和透皮擴(kuò)散速率，與單純給藥組

9、相比，從第6小時起有極顯著差異；與促透劑組相比，從第6小時起有極顯著差異，第24小時有顯著差異。 在體實(shí)驗(yàn)中以10％蛋清液對大鼠足跖皮下注射，制造急性炎癥模型，用排水容積法測量大鼠足跖容積，以造模后大鼠足跖腫脹率、足跖腫脹抑制率為指標(biāo)，觀察在不同促透方法下草烏提取液的抗炎作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：儀器組在致炎后第9小時的足跖腫脹率分別為14.44±8.25％，與模型組及單純給藥組相比，有顯著差異(p＜0.05)。儀器+促透劑組在致炎后

10、第1、3、6、9、12小時的足跖腫脹率分別為27.86±4.73％、25.61±4.76％、22.65±6.71％、12.49±8.07％和3.15±5.49％，與模型組相比，致炎后第1、3、6小時有極顯著差異(p＜0.01)，第9小時有顯著差異(p＜0.05)；與單純給藥組相比，致炎后第1、3小時有極顯著差異(p＜0.01)，第9、12小時有顯著差異(p＜0.05)；與促透劑組相比，致炎后第3小時有極顯著差異(p＜0.01)；與儀器組

11、相比，致炎后第3小時有極顯著差異(p＜0.01)，第1小時有顯著差異(p＜0.05)。結(jié)果表明，應(yīng)用促透劑、低頻電磁復(fù)合脈沖刺激，以及二者聯(lián)合促進(jìn)草烏提取物的透皮吸收，能對蛋清溶液所致的急性炎癥有明顯的抑制作用，足跖容積和足跖腫脹度與模型組比較有顯著下降，顯示出其抗急性炎癥的作用。其中促透劑與低頻電磁復(fù)合脈沖刺激對促進(jìn)藥物的透皮吸收發(fā)揮藥效有協(xié)同作用。 另外在本實(shí)驗(yàn)中通過對動物局部皮膚反應(yīng)的觀察，發(fā)現(xiàn)各組用藥或用藥加儀器均達(dá)十幾

12、個小時，而皮膚紅斑及焦痂形成分值很低，說明這種給藥方法對皮膚無嚴(yán)重的傷害性刺激。 我們對實(shí)驗(yàn)后的皮膚組織分別進(jìn)行了光鏡和電鏡下的觀察，結(jié)果顯示施加儀器各組細(xì)胞排列不如單純給藥組規(guī)則。 以上結(jié)果表明，使用促透劑、低頻電磁復(fù)合脈沖刺激對草烏提取物中新烏頭堿成分有促透效果，二者聯(lián)合應(yīng)用促透效果更為顯著，具有協(xié)同效應(yīng)，可明顯提高新烏頭堿的透皮吸收速率，對蛋清溶液所致的急性炎癥有明顯的抑制作用。對皮膚組織形態(tài)學(xué)的觀察結(jié)果揭示了低頻