家兔半膜肌兩型肌纖維全基因達(dá)譜差異的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：運(yùn)用基因芯片技術(shù)對(duì)家兔半膜肌的固有亞部和副半膜肌背側(cè)亞部的全基因表達(dá)譜進(jìn)行篩選，分析其表達(dá)變化的差異基因，以期了解骨骼肌兩型肌纖維之間的基因表達(dá)情況，為進(jìn)一步研究?jī)尚图±w維的區(qū)別和肌纖維類型轉(zhuǎn)換的相關(guān)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)以10只成年家兔為研究對(duì)象，雌雄不限，其中5只用于基因芯片實(shí)驗(yàn)，5只用于大體解剖和RT-PCR實(shí)驗(yàn)。取家兔后肢右側(cè)半膜肌的固有半膜肌亞部和副半膜肌背側(cè)亞部進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，運(yùn)用基因芯片技術(shù)篩選兩個(gè)亞部全

2、基因表達(dá)譜的差異基因以及采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分析MHC各亞型以及CaN、CaMKⅡα、AMPK等基因在兩亞部中的表達(dá)差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、基因芯片檢測(cè)家兔半膜肌兩亞部中有4710條基因表達(dá)差異，其中去除未知基因名及其基因名相同的4423條基因，還剩下287條已知基因，其中168條上調(diào)，119條下調(diào)。
　　 2、家兔半膜肌兩個(gè)亞部中，固有半膜肌亞部只含有慢肌，表達(dá)MHCⅠ型，副半膜肌背

3、側(cè)亞部為快肌，表達(dá)MHCⅡb、MHCⅡx、少量MHCⅡa，同時(shí)兩亞部都表達(dá)CaN、CaMKⅡα、AMPK基因，但副半膜肌背側(cè)亞部的表達(dá)量明顯高于固有半膜肌亞部。
　　 結(jié)論：
　　 1、骨骼肌快肌纖維與慢肌纖維之間有4710條基因差異，去除未知名基因及基因名相同的4423條差異基因，共有287條已知基因差異表達(dá)，其中168條基因上調(diào)，119條基因下調(diào)。這些基因涉及骨骼肌細(xì)胞的生物學(xué)過(guò)程、細(xì)胞組分、分子功能、物質(zhì)代謝等。<